[发明专利]一种电荷自翻转激活线粒体靶向功效的两亲性聚合物胶束的制备方法

说明书

本发明提出的一种电荷自翻转激活线粒体靶向的两亲性聚合物胶束的制备方法。通过制备PBMDA和TPP‑PEG‑NH₂，并与十二胺通过熔融聚合反应得到两亲性聚合物，之后在含有上转换纳米粒子(UCNPS)的DMSO溶液中加入两亲聚合物，随后通过透析得到TPP/NIR@Ce6/UCNPS。该制备该方法操作简单，反应条件温和，制备的聚合物胶束胶束尺寸良好，能够在溶酶体中电荷自翻转暴露出线粒体靶向基团，从而将药物靶向递送到线粒体。

技术领域

本发明涉及线粒体靶向技术领域，特别涉及一种电荷自翻转激活线粒体靶向功效的两亲性聚合物胶束的制备方法。

背景技术

光动力疗法(Photodynamic therapy,PDT)是一种新兴的治疗肿瘤的方式。它作为一种新型的非侵入性的肿瘤治疗方式，其方法是通过将光敏剂递送至肿瘤组织，利用适当波段的光激发产生能量，使肿瘤组织周围的氧生成活性很高的单线态氧，从而杀伤肿瘤细胞。PDT具有低毒性，安全性高的特点，可以与其他治疗手段，如手术、放化疗同时进行。PDT还具有高选择性的优势，一般可以达到在特定部位治疗肿瘤的目的，而不会对其他正常组织产生影响。但是PDT中光敏剂多是一些疏水性的有机分子，在生理环境中溶解度低，在血液中能被快速清除，这极大的限制了PDT的应用。近年来，研究者们致力于开发各种纳米药物载体来提高PDT疗效。纳米药物载体在递送药物方面具有以下优势：(1)提高药物的生物利用度；(2)提高疏水性药物的溶解性；(3)经过靶向基团修饰后可实现靶向给药，降低副作用；(4)通过内部或外部刺激实现药物的可控释放；(5)提高药物的溶解度和稳定性，增强抗肿瘤效果。

各种特定部位的生物刺激(即pH值、氧化还原、活性氧、酶或两者的组合)的存在可以被用来触发纳米粒子的电荷翻转。在这些刺激中，肿瘤的生理和细胞外环境之间的pH值梯度是最经常使用的触发信号之一。生理环境的pH值约为7.4，而实体瘤的细胞外环境的pH值通常在6.4-6.8之间。此外，内/溶酶体区间的pH值通常在4.5-5.5之间。肿瘤的细胞外和细胞内环境之间存在这种pH值梯度，为精确设计针对肿瘤部位的智能药物输送系统提供了机会。因此，利用这种特定部位的pH值，开发pH响应的药物递送系统是可行的，它可以有效地绕过肿瘤细胞外或细胞内微环境的复杂生物屏障，有效的将负载药物释放到癌细胞内的目标位置，以达到最大的治疗效果。在pH值诱导的负电荷翻转策略中，由具有pH值依赖性的电荷翻转分子的聚合物组成或装饰的纳米载体被制造出来。这些分子在生理pH值下显示出负电荷，而在酸性pH值下变成正电荷。

光敏剂的亚细胞定位是影响PDT疗效的关键因素，因为它决定光动力损伤的最初位点。作为细胞的能量工厂，线粒体时时刻刻为细胞的新陈代谢提供着最直接的能量三磷酸腺苷(ATP),对细胞的生长增殖和死亡起着至关重要的作用，而且控制着细胞的新陈代谢，其本身亦与细胞的致癌机理有着十分密切的联系。线粒体是光动力治疗的重要靶点，且定位在线粒体的光敏剂比定位在其它细胞器的光敏剂能更有效地杀死肿瘤细胞。光照后起始反应是在线粒体上形成单态氧，接着线粒体上的活性氧诱导线粒体通透性改变进而导致线粒体去极化，变形，细胞色素c的释放，最终导致细胞凋亡。因此如能设计、制备功能性纳米载药体系，可以选择性地将光动力治疗剂积累于线粒体，有助于增强PDT疗效。

发明内容

本发明的目的是为了将光敏剂递送到相关亚细胞器(线粒体)，而提出的一种电荷自翻转激活线粒体靶向的两亲性聚合物胶束的制备方法。该方法操作简单，反应条件温和，制备的聚合物胶束胶束尺寸良好，能够在溶酶体中电荷自翻转暴露出线粒体靶向基团，从而将药物靶向递送到线粒体。其具体技术方案如下所述。

作为第一方面，本发明提供了一种电荷自翻转激活线粒体靶向功效的两亲性聚合物胶束的制备方法，所述步骤包括：

S1，PBMDA的制备；