[发明专利]家蚕嗅觉受体基因BmOR56的用途

说明书

本发明公开了家蚕嗅觉受体基因BmOR56的用途，用于家蚕育种，能够提升家蚕的食性范围。

技术领域

本发明涉及家蚕育种相关技术领域。更具体地说，本发明涉及一种家蚕嗅觉受体基因BmOR56的用途。

背景技术

家蚕是一种典型的鳞翅目昆虫，主要以桑叶为食，也能取食桑科、菊科或榆树科等其它植物。有研究表明，通过对非洲爪蟾卵母细胞中所有幼虫表达的嗅觉受体进行功能分析，发现其中一种嗅觉受体BmOR56对顺式茉莉酮具有很高的敏感性，而顺式茉莉酮是桑叶的主要挥发物质之一，能特异性的吸引家蚕幼虫。因此，将BmOR56基因用于家蚕育种，可能提升家蚕的食性范围。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种家蚕嗅觉受体基因BmOR56的用途，能够用于家蚕育种，提升家蚕的食性范围。

为了实现本发明的这些目的和其它优点，根据本发明的一个方面，本发明提供了家蚕嗅觉受体基因BmOR56的用途，用于家蚕育种。

进一步地，对家蚕嗅觉受体基因BmOR56执行敲除，将敲除BmOR56的家蚕用于家蚕育种。

进一步地，根据BmOR56基因CDS序列信息，设计gRNA靶位点，靶位点序列如SEQ IDNO.2～3所示；根据靶位点序列设计引物并合成sgRNA，引物序列如SEQ ID NO.4～6所示；将sgRNA和cas9蛋白注射入家蚕蚕卵；注射蚕卵孵化后经过饲养，筛选出所需的家蚕品系用于家蚕育种。

进一步地，用于培育不同取食行为的家蚕。

进一步地，用于培育取食生菜的家蚕。

进一步地，用于培育取食甘蓝的家蚕。

进一步地，用于培育不同生长速度的家蚕。

本发明至少包括以下有益效果：

本发明提供了家蚕嗅觉受体基因BmOR56的用途，能够用于家蚕育种，提升家蚕的食性范围。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

附图说明

图1为通过CRISPR/cas9获得突变体；(A)BmOR56基因结构和gRNA位点，BmOR56基因位于第28染色体，有6个外显子，黑线表示内含子，矩形表示外显子，Met表示起始密码子，stop表示终止密码子；2个gRNA靶位点均位于第一外显子上，红色背景序列为gRNA靶序列，蓝色背景序列为PAM(protospacer adjacent motif)；(B)纯合突变体的产生；将sgRNA和cas9蛋白的混合物注射到蚕卵中，在发育成蛾并产卵后，对其基因型进行鉴定，并保留杂合子突变体留种，最终在G3代中筛选出纯合突变体；

图2为突变系中BmOR56基因结构分析和氨基酸结构分析；(A)两种突变体在1号靶点的基因组结构变化；(B)两种突变体在2号靶点的基因组结构变化；(C)突变体中基因发生无义突变；

图3为BmOR56及相关基因的表达分析；(A)BmOR56在不同发育时期的表达分析；(B)BmOrco在不同发育时期的表达分析；(C)离子型受体的表达分析；*表示T检验结果P0.05，**表示T检验结果P0.01，***表示T检验结果P0.001；

图4为突变体中肠解剖模式图；给饥饿12h后的五龄起幼虫分别饲喂苹果(A)、梨(B)、玉米(C)、生菜(D)和甘蓝(E)，喂食12h后的家蚕中肠显示为苹果(F)、梨(G)、玉米(H)、生菜(I)和甘蓝(J)；

图5为突变体家蚕广食性检测分析；A：体重变化；B：形体变化模式图；C：蚕沙数；D：添食前状态；E：添食后状态；统计分析每头家蚕的平均数据。

具体实施方式