[发明专利]一种基于Co3

说明书

本发明涉及免疫学分析检测技术内一种基于Co₃O₄磁性纳米粒子信号放大探针的SPR免疫传感器，第1步，将Co₃O₄磁性纳米粒子表面修饰羧基，并活化，再连接二级抗体Ab₂，制得Co₃O₄ NPs‑Ab₂纳米信号放大探针；第2步，将SPA蛋白固定于表面等离子体共振免疫传感器SPR基底，再连接捕获抗体Ab₁后用牛血清白蛋白封闭，接着先后通入抗原溶液和Co₃O₄ NPs‑Ab₂信号放大探针，温育形成三明治夹心的SPR免疫传感器。本发明的羧基化的Co₃O₄纳米粒子，其高折射率和高分子量可有效増强SPR信号，同时通过在外部磁场中分离和富集复杂样品中的靶标，可以极大减少未知化合物的背景干扰，具有良好的生物相容性，制备信号放大探针，结合三明治夹心法，使SPR信号增强，用于蛋白分子的高灵敏检测。

技术领域

本发明涉及免疫学检测分析技术领域，具体涉及用于检测蛋白分子的Co₃O₄ 磁性纳米粒子信号放大探针的SPR免疫传感器。

背景技术

20世纪60年代Otto和 Kretschmann分别发明了用可见光激发表面等离子体的方法，1982年Nylander等首次将表面等离子体共振（Surfance plasmon resonance， SPR）技术用于免疫传感器领域，1983年Liedberg等成功地将SPR用于IgG蛋白与其抗原的反应测定。SPR可用于实时分析，简单快捷地监测DNA与蛋白质之间、蛋白质与蛋白质之间、药物与蛋白质之间、抗原与抗体之间、受体与配体之间等等生物分子之间的相互作用,在生物研究、医疗检测、食品检测及环境监测等领域具有广泛的应用。

SPR技术可与免疫传感器结合，实现不同类型的蛋白质的高灵敏度检测。三明治夹心法是SPR免疫传感器用于抗原物质测定时的重要方法，通过引入二级抗体，增加SPR传感表面的质量，改变传感表面的折射率，从而提高SPR传感器的性能，提高了灵敏度和特异性。

Co₃O₄磁性纳米粒子可被用做信号放大探针，改进SPR传感器性能。但在实际SPR免疫检测中，容易受未知化合物的干扰，而影响检测的准确性、灵敏度和检测限。

发明内容

本发明的目的是提供通过改进Co₃O₄磁性纳米粒子的放大探针以增加SPR传感器信号强度，改进SPR检测的准确性、灵敏度和检测限的基于Co₃O₄ 磁性纳米粒子信号放大探针的SPR免疫传感器。

本发明的目的是这样实现的 ，一种基于Co₃O₄ 磁性纳米粒子信号放大探针的SPR免疫传感器，其特征在于，通过如下步骤制备得到：

第1步，将Co₃O₄ 磁性纳米粒子表面修饰羧基，并活化，再连接二级抗体Ab₂，制得Co₃O₄ NPs-Ab₂纳米信号放大探针；

第2步，将SPA蛋白固定于表面等离子体共振免疫传感器SPR基底，再连接捕获抗体Ab₁后用牛血清白蛋白封闭，接着先后通入抗原溶液和Co₃O₄ NPs信号放大探针，温育形成三明治夹心的SPR免疫传感器。