[发明专利]杀虫剂基因及使用方法在审

专利信息
申请号: 202210367092.1 申请日: 2016-12-16
公开(公告)号: CN114621330A 公开(公告)日: 2022-06-14
发明(设计)人: J·帕克斯;K·B·罗伯茨;R·E·塔耶尔 申请(专利权)人: 农业生物群落股份有限公司
主分类号: C07K14/325 分类号: C07K14/325;C07K14/195;C12N15/32;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46;C12N15/31;A01N37/46;A01P7/04
代理公司: 中国贸促会专利商标事务所有限公司 11038 代理人: 陈晶晶
地址: 美国北*** 国省代码: 暂无信息
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要:
搜索关键词: 杀虫剂 基因 使用方法
【说明书】:

提供了具有杀虫活性的组合物及其使用方法。组合物包括具有杀虫活性的分离的和重组的多肽、编码所述多肽的重组和合成核酸分子、包含所述核酸分子的DNA构建体和载体、包含所述载体的宿主细胞和针对所述多肽的抗体。编码所述多肽的多核苷酸序列可用于DNA构建体或表达盒中,以用于在目标生物体中转化和表达。所提供的组合物和方法可用于产生具有增强的害虫抗性或耐受性的生物。还提供了包含编码本发明的杀虫蛋白的核苷酸序列的转基因植物和种子。此类植物对昆虫和其他害虫具有抗性。提供了用于产生本文公开的各种多肽的方法,以及用于使用那些多肽来控制或杀死害虫的方法。还包括用于检测样品中本发明多肽的方法和试剂盒。

本申请是申请日为2016年12月16日、发明名称为“杀虫剂基因及使用方法”的中国发明专利申请No.201680080838.3的分案申请。

发明领域

本发明涉及用于防治害虫,特别是植物害虫的方法和组合物。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2015年12月22日提交的美国临时申请序列号62/270,742和2016年10月25日提交的美国临时申请序列号62/412,619的权益,这些申请的内容通过引用整体并入本文。

参考作为文本文件通过EFS-WEB提交的序列表

将序列表的正式副本作为ASCII格式的序列表(其文件名为AgB024PCT-1029226_SeqList.txt,创建于2016年12月16日,大小为1.18MB,并且与说明书同时提交)通过EFS-Web以电子方式提交。该ASCII格式文件中包含的序列表是说明书的一部分,并且通过引用整体并入本文。

背景

害虫、植物疾病和杂草可以是对作物的严重威胁。估计由于害虫和疾病造成的损失占全世界农业生产的37%,其中13%由昆虫、细菌和其他生物造成。

毒素是毒力决定因子,其在微生物致病性和/或宿主免疫反应的逃避中起重要作用。来自革兰阳性细菌芽孢杆菌属(Bacillus),特别是苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)的毒素已被用作杀虫蛋白。目前的策略使用表达这些毒素的基因来产生转基因作物。表达杀虫蛋白毒素的转基因作物用于对抗昆虫造成的作物损害。

尽管使用芽孢杆菌毒素已经成功地控制了昆虫,但在世界上其中此类毒素已被广泛使用的许多地方,一些目标害虫中已经发展出对Bt毒素的抗性。解决该问题的一种方法是将Bt作物与常规非Bt作物(避难所)以交替行播种。避免或减缓昆虫抗性发展的一种可选方法是在转基因植物中堆积具有不同抗昆虫作用模式的杀虫基因。目前使用表达杀虫蛋白毒素的转基因作物的策略越来越强调在源自苏云金芽孢杆菌的那些毒素之余发现新型毒素。可证明这些毒素可用作来源于苏云金芽孢杆菌的那些毒素的替代物,部署在抗昆虫和抗害虫的转基因植物中。因此,需要新的毒素蛋白。

附图简述

图1提供了SEQ ID NO:209、207和206的氨基酸比对。突出显示的区域表示三种多肽之间氨基酸相同的区域。

图2提供了在西部玉米根虫生物测定中使用的测定评分指南(大小x死亡率矩阵)。“s”表示尺寸小,“m”表示尺寸中等,“b”表示尺寸大。

图3提供了抗SGSB的APG01037.1(SEQ ID NO:209)的时程分析的结果。

图4提供了抗大豆蚜虫的APG01037.1(SEQ ID NO:209)的时程分析的结果。

图5提供了抗西部玉米根虫的APG01037.1(SEQ ID NO:209)的浓度-反应曲线。

图6提供了抗SGSB的APG01037.5(SEQ ID NO:211)的时程分析的结果。

下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于农业生物群落股份有限公司,未经农业生物群落股份有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202210367092.1/2.html,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种抗虫蛋白及其制备方法和应用-202310743969.7
  • 张玉静;王营;左丹 - 莱肯生物科技(海南)有限公司
  • 2023-06-24 - 2023-10-27 - C07K14/325
  • 本发明公开了一种新抗虫蛋白的制备方法及其应用,属于基因工程领域。本发明提供了一种新抗虫蛋白及其编码基因,新蛋白为抗虫突变蛋白,该抗虫突变蛋白为Cry1Ie3蛋白在第182位和第233位发生了突变的蛋白。所述应用是编码基因在培育抗虫转基因玉米植株中的应用,在制备抗虫突变蛋白中的应用,以及抗虫突变蛋白在制备杀虫剂中的应用。本发明通过对Cry1Ie3蛋白的人工改造,提高了它的活性。
  • 一种抗虫蛋白及其制备方法和应用-202310779864.7
  • 张玉静;王营;左丹;旷乐;王晖;李晨 - 莱肯生物科技(海南)有限公司
  • 2023-06-29 - 2023-09-29 - C07K14/325
  • 本发明公开了一种新抗虫蛋白的制备方法及其应用,属于基因工程领域。本发明提供了一种新抗虫蛋白及其编码基因,新蛋白为抗虫突变蛋白,该抗虫突变蛋白为Cry1Ie4蛋白在第174位、第209位和第260位发生了突变的蛋白。所述应用是编码基因在培育抗虫转基因玉米植株中的应用,在制备抗虫突变蛋白中的应用,以及抗虫突变蛋白在制备杀虫剂中的应用。本发明通过对Cry1Ie4蛋白的人工改造,提高了它的活性。
  • 一种模拟Bt Cry1Ac蛋白关键抗虫功能表位的短肽及其编码基因与应用-202111397024.1
  • 徐重新;刘贤金;高美静;胡晓丹;刘媛;仲建锋;谢雅晶;张霄 - 江苏省农业科学院
  • 2021-11-23 - 2023-09-29 - C07K14/325
  • 本发明提供一种可模拟Bt Cry1Ac蛋白关键抗虫功能表位的短肽及其编码基因与应用,该短肽DNA序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;该短肽能与棉铃虫钙黏蛋白Bt Cry蛋白结合区特异性结合,且经克隆替换Bt Cry蛋白DomianⅡ‑Loop2区和‑Loop3区以及替换Bt Cry1Ac蛋白抗独特型人源重链单域抗体CDR2区,重组的Bt Cry1Ac蛋白和重组的Bt Cry1Ac蛋白抗独特型抗体均对棉铃虫和小菜蛾具有良好的杀虫活性;本发明采用抗虫蛋白靶标害虫关键受体作为靶点,通过体外高通量筛选与鉴定的方式,靶向获得具备模拟抗虫蛋白关键抗虫功能表位的短肽,目标性强,制备周期短,短肽氨基酸序列小,适合蛋白质关键表位功能替代,对Bt Cry1Ac蛋白靶标农业害虫安全性生物防控具有重要的科学意义和实用价值。
  • 一种稳定同位素13-202010227154.X
  • 李鹏;唐雪明;潘爱虎;贾军伟;武国干;孙宇;莫芹;蒋玮;刘华;白蓝;王金斌 - 上海市农业科学院
  • 2020-03-27 - 2023-06-13 - C07K14/325
  • 一种稳定同位素13C标记的Cry蛋白的制备方法,通过1)合成、克隆Cry基因;2)制备包含质粒表达载体的工程菌;3)原核表达;4)包涵体蛋白的变性、纯化及复性,在原核表达过程中,使用以葡萄糖为唯一碳源的培养基,使Cry蛋白中含有稳定同位素13C标记,获得稳定同位素13C标记的Cry蛋白,其具有较强的杀虫活性,纯度达到99%,适用于采用稳定同位素质谱技术分析Cry蛋白的环境行为和生态效益,为评价转Cry基因植物和释放的Cry蛋白的环境安全和生态学效应提供物质基础和技术支持。
  • 一种模拟Bt Cry毒素共性结构和功能的多肽及其编码基因与应用-202310192513.6
  • 徐重新;刘媛;金嘉凤;沈成;陈蔚;胡晓丹;谢雅晶;张霄;朱庆 - 江苏省农业科学院
  • 2023-03-02 - 2023-05-30 - C07K14/325
  • 本发明提供一种具备模拟Bt Cry毒素抗虫蛋白共性结构的多肽及其编码基因与应用,该多肽核苷酸序列、氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示;该多肽能与Bt Cry毒素靶标害虫棉铃虫钙黏蛋白受体特异性结合,且经原核表达后的多肽蛋白对供试的棉铃虫具有良好的杀虫活性,以其为免疫原免疫小鼠获得的血清能同时识别6种Bt Cry毒素;本申请提供的具备模拟Bt Cry毒素共性结构和功能的多肽在替代Bt Cry毒素抗虫蛋白用于靶标农业害虫绿色防治和作为免疫原用于高效制备Bt Cry毒素检测用广谱抗体方面具有重要的科学意义和广阔的应用价值。
  • 一种解决杀虫毒素被昆虫肠道消化酶过度酶解的毒素改造方法-202010419515.0
  • 吴松青;张飞萍;郭雅洁 - 福建农林大学
  • 2020-05-18 - 2022-10-28 - C07K14/325
  • 本发明提供了一种解决杀虫毒素被昆虫肠道消化酶过度酶解的毒素改造方法。其是利用PeptideCutter或荧光多肽酶活测定或多重底物质谱分析法(MSP‑MS)对昆虫肠道消化酶的特异性切割位点进行测定;然后利用Swiss Model和PyMOL软件相结合筛选出位于毒素非功能区域的改造位点;最后将筛选到的多个位点同时突变为不被肠道蛋白酶识别的氨基酸。本发明改造方法能够对毒素上的多个蛋白酶切割位点同时进行准确的突变,显著的提高对靶标昆虫的杀虫活性,具有特异性强,操作简单等优点。这为农、林业害虫的生物防治以及抗性的治理提供了一条有利的途径。
  • 毒素基因及其使用方法-202180014711.2
  • N·朱古勒;M·杜利;J·扎伊采娃;D·莱蒂嫩;T·埃贝勒;丁雷;Y·卡多萨 - 巴斯夫农业种子解决方案美国有限责任公司
  • 2021-02-19 - 2022-09-30 - C07K14/325
  • 提供了用于向细菌、植物、植物细胞、组织和种子赋予杀害虫活性的组合物和方法。提供了包括毒素多肽的编码序列的组合物。所述编码序列可以用于DNA构建体或表达盒中,以在植物和细菌中进行转化和表达。组合物还包括经转化的细菌、植物、植物细胞、组织和种子。具体地,提供了经分离的毒素核酸分子。另外,涵盖了对应于多核苷酸的氨基酸序列,并且抗体特异性地结合那些氨基酸序列。具体地,本发明提供了经分离的核酸分子,所述经分离的核酸分子包括编码SEQ ID NO:22到42中的任一个所示的氨基酸序列的核苷酸序列或SEQ ID NO:1到21中的任一个所示的核苷酸序列,以及其变体和片段。
  • 一种大肠杆菌表达蛋白Cry5B的制备及抗大熊猫蛔虫活性-202111630693.9
  • 谢跃;黄文俊 - 四川农业大学;成都大熊猫繁育研究基地
  • 2021-12-28 - 2022-09-16 - C07K14/325
  • 本申请实施例公开了一种大肠杆菌表达蛋白Cry5B的制备及抗大熊猫蛔虫活性,用于测定大肠杆菌异源表达重组Cry5B蛋白对大熊猫蛔虫的杀灭活性。本申请实施例方法包括:运用在线工具GENSCAN获取Bt Cry5B基因完整开放阅读框序列,分别在序列5’和3’端加入BamH I和Hind III酶切位点及其保护性碱基,得到嵌合序列;合成嵌合序列得到合成序列;将合成序列插入pMD19‑T克隆质粒进行TA克隆和测序分析,得到的克隆质粒用双酶切后连入pET‑32a(+)原核表达载体,得到pET‑32a‑Cry5B重组质粒;将pET‑32a‑Cry5B重组质粒转入原核表达菌DE3进行表达,得到重组Cry5B蛋白;重组Cry5B蛋白亲和层析后,得到纯化的重组Cry5B蛋白;将纯化的重组Cry5B蛋白进行倍比稀释,评价不同浓度重组Cry5B蛋白对大熊猫蛔虫成虫和L4期幼虫的杀灭活性。
  • 杀虫基因的AXMI-192家族和使用它们的方法-201810244642.4
  • K·S·桑普森;D·J·汤姆索;R·郭 - 巴斯夫农业种子解决方案美国有限责任公司
  • 2010-07-30 - 2022-08-30 - C07K14/325
  • 提供了对细菌、植物、植物细胞、组织和种子赋予杀虫活性的组合物和方法。提供了包含毒素多肽编码序列的组合物。所述编码序列可以在用于植物和细菌中转化和表达的DNA构建体或表达盒中使用。组合物也包含转化的细菌、植物、植物细胞、组织和种子。特别地,提供了分离的毒素核酸分子。另外,本发明包含与所述多核苷酸对应的氨基酸序列和与那些氨基酸序列特异性结合的抗体。特别地,本发明提供了分离的核酸分子以及其变体和片段,所述分离的核酸分子包含编码SEQ ID NO:28‑62中所示氨基酸序列的核苷酸序列或SEQ ID NO:1‑27中所示的核苷酸序列。
  • 杀虫基因和使用方法-202210361418.X
  • J·帕克斯;K·B·罗伯斯;R·E·塞耶 - 农业生物群落股份有限公司
  • 2016-05-18 - 2022-07-29 - C07K14/325
  • 提供了具有杀虫活性的组合物及其使用方法。所述组合物包括具有杀虫活性的分离的和重组的多肽,编码所述多肽的重组和合成的核酸分子,包含所述核酸分子的DNA构建体和载体,包含所述载体的宿主细胞和针对所述多肽的抗体。编码所述多肽的核苷酸序列可以用于DNA构建体或表达盒中,用于在目的生物中的转化和表达。提供的组合物和方法可用于生产具有增强的害虫抗性或耐受性的生物。还提供了包含编码本发明的杀虫蛋白质的核苷酸序列的转基因植物和种子。这种植物对昆虫和其他害虫具有抗性。提供了用于产生本文公开的各种多肽以及使用这些多肽控制或杀死害虫的方法。还包括用于检测样品中的本发明多肽的方法和试剂盒。
  • 具有改进的活性谱的杀昆虫多肽及其用途-202210584952.7
  • M.艾素美维尔科克安;T.亚马莫托 - 先锋国际良种公司
  • 2015-10-14 - 2022-07-12 - C07K14/325
  • 本发明涉及具有改进的活性谱的杀昆虫多肽及其用途。本披露提供衍生自苏云金芽孢杆菌菌株的核酸及其变体和片段,该核酸及其变体和片段编码变体多肽,该变体多肽针对包括鳞翅目和鞘翅目的昆虫有害生物具有增加的杀有害生物活性。本披露的具体实施例提供编码杀有害生物蛋白的分离的核酸、杀有害生物组合物、DNA构建体、以及包含实施例的核酸的经转化的微生物和植物。这些组合物可应用于控制有害生物特别是植物有害生物的方法中。
  • 杀虫基因和使用方法-202210372692.7
  • J·帕克斯;K·B·罗伯茨;R·E·赛耶 - 农业生物群落股份有限公司
  • 2016-04-15 - 2022-06-21 - C07K14/325
  • 提供了具有杀虫活性的组合物及其使用方法。组合物包括具有杀虫活性的分离的和重组的多肽、编码所述多肽的重组的合成的核酸分子、包含所述核酸分子的DNA构建体和载体、包含所述载体的宿主细胞,以及针对所述多肽的抗体。编码该多肽的核苷酸序列可用于DNA构建体或表达盒中,用于在目的生物中转化和表达。所提供的组合物和方法可用于产生具有增强的害虫抗性或耐受性的生物。还提供了包含编码本发明的杀虫蛋白的核苷酸序列的转基因植物和种子。这些植物对昆虫和其他害虫具有抗性。提供了用于产生本文公开的多种多肽的方法,以及使用那些多肽来控制或杀灭害虫的方法。还包括用于在样品中检测本发明多肽的方法和试剂盒。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top