[发明专利]一种从地表水和/或土壤中分离和提取富里酸的方法

权利要求书

1.一种从地表水和/或土壤中分离和提取富里酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：样品的前处理

采集土壤样品和/或地表水样品，将土壤样品依次进行水提取和碱溶液提取，分别得到土壤溶解性有机质水提取液和土壤溶解性有机质碱提取液；

将土壤溶解性有机质水提取液、土壤溶解性有机质碱提取液和/或地表水样品过滤，得到前处理后的样品，并置于4℃保存；

步骤2：胡敏酸的分离

将步骤1得到的前处理后的样品的pH值调节至2.0±0.2，置于4℃保存24h后，离心，分离得到第一上清液和第一沉淀物，将第一沉淀物用纯水冲洗，然后冷冻干燥，得到纯净的胡敏酸固体样品，保存于干燥皿中；

步骤3：富里酸的沉淀分离

将步骤2得到的第一上清液的pH值调节至7.5-8.5，测量三维荧光，记录富里酸的特征峰M的位置和原始荧光强度；

在第一上清液中，缓慢地逐滴加入FeCl₃溶液，同时缓慢地逐滴加入NaOH溶液，并保持缓慢搅拌，使溶液的pH值保持在7.5-8.5，当溶液出现沉淀时，停止加入FeCl₃溶液，保持缓慢搅拌5-10分钟以稳定pH值为7.5-8.5，离心，得到第二上清液和第二沉淀物；

将第二上清液的pH值调节至7.5-8.5，测量三维荧光，以第二上清液中富里酸的特征峰M的位置和原始荧光强度为监测指标，重复上述沉淀操作5-10次，合并第二沉淀物；

步骤4：沉淀样品中富里酸的提取

将步骤3合并的第二沉淀物用纯水冲洗，并根据三维荧光结果，判断沉淀物中含有的富里酸的含量，按照质量比为1:10-1:50，加入超纯水，充入N₂置于摇床中，震荡，离心，得到第三上清液和第三沉淀物，测量第三上清液的三维荧光，以富里酸的特征峰M的荧光强度作为监测指标，重复上述提取操作5-10次，当荧光强度不再下降时，停止提取，合并第三上清液，置于4℃保存；

根据三维荧光结果，判断第三沉淀物中含有的富里酸的含量，按照质量比为1:10-1:50，加入pH值为10的水溶液，震荡，离心，得到第四上清液和第四沉淀物，测量第四上清液的三维荧光，以富里酸的特征峰M的荧光强度作为监测指标，重复提取操作5-10次，当荧光强度不再下降时，停止提取，合并第四上清液，置于4℃保存；

按照相同的提取条件，并根据三维荧光结果，判断沉淀物中含有的富里酸的含量，按照质量比为1:10-1:50，向第四沉淀物中加入pH值为12的水溶液重复提取5-10次，离心，合并第五上清液，置于4℃下保存；

将合并的第三上清液、合并的第四上清液和合并的第五上清液分别进行冷冻干燥，得到三种由不同pH溶液提取得到的富里酸固体样品。

2.根据权利要求1所述的从地表水和/或土壤中分离和提取富里酸的方法，其特征在于，步骤1中，所述土壤溶解性有机质水提取液和所述地表水样品的过滤是采用孔径为0.45μm的玻璃纤维滤膜，所述土壤溶解性有机质碱提取液的过滤是采用孔径为0.45μm的聚四氟乙烯滤膜。

3.根据权利要求1所述的从地表水和/或土壤中分离和提取富里酸的方法，其特征在于，步骤1中，所述水提取的具体方法是：将研磨过筛后的土壤样品与超纯水按质量比为1:10进行混合，并置于摇床中，第一次震荡，离心，得到一次溶解性有机质水提液和一次土壤沉淀物；

在N₂氛围中，将一次土壤沉淀物与超纯水按质量比为1:10进行混合，并置于摇床中，第二次震荡，离心，得到二次溶解性有机质水提物和二次土壤沉淀物；

合并一次溶解性有机质水提液和二次溶解性有机质水提液，置于4℃保存；

所述碱溶液提取的具体方法是：

合并一次土壤沉淀物和二次土壤沉淀物，按质量比为1:10，与浓度为0.1M的NaOH溶液进行混合，并充入N₂，置于摇床中，第三次震荡，离心，得到一次溶解性有机质碱提取液和三次土壤沉淀物；

将三次土壤沉淀物按质量比为1:10，与浓度为0.1M的NaOH溶液进行混合，并充入N₂，并置于摇床中，第四次震荡，离心，得到二次溶解性有机质碱提取液和四次土壤沉淀物；

合并一次溶解性有机质碱提取液和二次溶解性有机质碱提取液，置于4℃保存。