[发明专利]一种用于肝癌诊断的生物标志物和试剂盒及检测方法

说明书

本发明公开了一种用于肝癌诊断的生物标志物和试剂盒及检测方法，属于分子标志物技术领域，所要解决的技术问题是如何提高肝细胞癌诊断的灵敏度和/或特异性。本发明提供了生物标志物和/或检测所述生物标志物的物质在肝细胞癌诊断或制备用于肝细胞癌诊断的产品中的应用；所述生物标志物为血浆外泌体CD48蛋白或血浆外泌体CD48蛋白和血浆AFP的组合。本发明的生物标志物CD48蛋白及检测方法具有敏感性强、特异性高的特点，灵敏度可以达到0.928，因此漏诊率（假阴性率）低，将其应用于临床肝细胞癌患者的诊断中可提高早期肝癌的诊断率，将亚临床肝癌或隐匿性肝癌从人群中筛查出来，有助于提高肝癌的治愈率及降低死亡率。

技术领域

本发明属于借助于测试材料的化学或物理性质来测试或分子材料的分子标志物技术领域，具体涉及一种用于肝癌诊断的生物标志物和试剂盒及检测方法。

背景技术

原发性肝癌（Primary liver cancer，PLC）是全球发病率排名第六，死亡率排名第三的消化系统恶性肿瘤。肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC；以下简称肝癌）约占原发性肝癌的75%-85%。超过60%的肝细胞癌患者在晚期才被确诊，因而无法得到及时有效的治疗。目前临床上常用于肝癌诊断的血清标志物敏感性均偏低，所以鉴定高敏感性和特异性的肝癌诊断标志物是临床上亟待解决的问题之一。

外泌体（Exosome）是一种直径约为40～200纳米（Nanometer，nm）、由细胞内多囊泡胞内体（Multi-vesicular endosome，MEV）成熟过程中膜向内出芽形成的具有脂质双分子层的腔内小泡，其所包含的蛋白质、核酸和脂类物质等，可以作为癌症的诊断和/或预后标志物，具有潜在的临床应用价值。但截至目前，尚未有肝细胞癌血浆来源的外泌体蛋白标志物及分子分类器的报道。因此，发现肝细胞癌血浆来源的血浆外泌体蛋白标志物及相应的分子分类器，进一步建立非侵入性、易操作性、高灵敏性和高特异性的肝细胞癌诊断或检测方法，将有助于肝细胞癌早发现、早诊断和早治疗。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于肝细胞癌诊断的生物标志物，所要解决的技术问题是如何提高肝细胞癌诊断的灵敏度和/或特异性。所要解决的技术问题不限于所描述的技术主题，本领域技术人员通过以下描述可以清楚地理解本文未提及的其它技术主题。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了生物标志物和/或检测所述生物标志物的物质的下述任一种应用：

A1）在肝细胞癌诊断或制备用于肝细胞癌诊断的产品中的应用；

A2）在肝细胞癌筛查或制备用于肝细胞癌筛查的产品中的应用；

A3）在评估肝细胞癌风险或制备用于评估肝细胞癌风险的产品中的应用；

A4）在肝细胞癌预后评估或制备用于肝细胞癌预后评估的产品中的应用；

A5）在鉴别区分肝细胞癌和肝硬化或制备鉴别区分肝细胞癌和肝硬化的产品中的应用；

所述生物标志物可为下述任一种：

B1）血浆外泌体中的CD48蛋白和血浆中的AFP；

B2）血浆外泌体中的CD48蛋白。

所述生物标志物可适用于ELISA常规的蛋白检测实验。

进一步地，所述血浆外泌体中的CD48蛋白在肝细胞癌样品（肝癌患者血浆样品）与对照样品（健康人和肝硬化患者血浆样品）中的表达水平有显著性差异。

进一步地，所述血浆外泌体中的CD48蛋白在肝癌样品中表达水平上调。