[发明专利]细胞激活能量蛋白及其制备方法

说明书

本发明公开了一种细胞激活能量蛋白的制备方法，本发明使用酪蛋白多肽和鲣鱼弹性蛋白肽结合，其中，酪蛋白多肽能够针对人体免疫细胞完成激活、修复、再生及提升活性，从而激发免疫系统的主动性，达到恢复及巩固自身免疫系统的作用；鲣鱼弹性蛋白肽中含有锁链素和异锁链素，能够与胶原蛋白肽发挥协同作用，激活人体真皮产生成纤维细胞，减缓弹性蛋白的流失，从而改善肌肤的弹性和柔软度，减少肌肤皱纹。本发明以茶氨酸乙酯及色氨酸甲酯盐酸盐为原料，与β‑酵母葡聚糖形成复合物，并以所述复合物作为酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽的肽载体，进而提升两种多肽的综合稳定性。

技术领域

本发明涉及多肽的制备技术领域，尤其涉及一种细胞激活能量蛋白及其制备方法。

背景技术

酪蛋白多肽是一种从牛乳酪蛋白中提炼酶解出来的小分子蛋白短肽，经消化系统吸收进入人体循环系统后，能够针对人体免疫细胞完成激活、修复、再生及提升活性，从而激发免疫系统的主动性，达到恢复及巩固自身免疫系统的作用。鲣鱼弹性蛋白肽提取自深海鲣鱼的心脏动脉球组织，鲣鱼弹性蛋白肽中含有锁链素和异锁链素，能够与胶原蛋白肽发挥协同作用，激活人体真皮产生成纤维细胞，减缓弹性蛋白的流失，从而改善肌肤的弹性和柔软度，减少肌肤皱纹。

酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽具有上述优点及功效，已作为有效成分应用于各类保健品的生产制备中。发明人发现，现有的应用中，酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽往往直接添加至口服保健品。酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽进入消化体统后，大部分被各类消化酶分解为氨基酸后吸收，难以发挥原有的生物活性功效。同时，多肽成分的稳定性也直接影响了有效成分的实际效果，多肽的不稳定性是物理及化学两方面双重影响产生的结果，多肽的非酶催化的脱酰胺反应与环境条件及多肽自身的结构有关，温度的升高及pH的变化都会诱导多肽脱酰胺反应的进行，造成残基的水解；另外，多肽形成的溶液容易发生氧化及水解，不利于产品的保存，并且由氧化或水解引发的多肽变性过程形成的中间体在溶液中的溶解度减小，容易析出并形成聚集体，产生难溶于水的沉淀，大大阻碍了多肽的吸收，对产品造成不利的影响。

专利CN 107858390 A提供了一种基于胃肠消化的玉米大分子多肽制备的方法，采用超声预处理玉米醇溶蛋白，显著提高酶解产物的均一性；专利CN 108576502 A公开了一种利用鳀鱼皮中活性多肽制备的复配物的方法，选用以红枣为主原料制备复配物并通过添加中草药成分丰富复配物功效再配合蜂蜜、苹果汁、鳀鱼活性多肽等成分进一步丰富复配物的口感，同时避免使用白糖，制备所得的复配物具有润肠通便、降火解毒、消食除胀、健脾益胃、明目的功效，同时通过添加鳀鱼活性多肽使复配物具有很好的抗氧化性能。上述专利都是将多肽直接作为原料，实际应用中可能会出现氧化、水解导致的功能下降等技术问题，并且不利于保存。

发明内容

有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所解决的技术问题是：(1)提供一种细胞激活能量蛋白的制备方法，提升细胞激活能量蛋白的稳定性、抗氧化性；(2)加强肽载体对蛋白肽的结合能力，提升细胞激活能量蛋白的乳化性能。

为了提升酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽的稳定性，发明人以茶氨酸乙酯及色氨酸甲酯盐酸盐为原料，与β-酵母葡聚糖形成复合物，并以所述复合物作为酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽的肽载体，进而提升两种多肽的综合稳定性。茶氨酸的乙酰化过程中，发明人选择了较低的反应温度以避免在70℃上出现的消旋现象。发明人在肽载体得制备中使用1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺来促进原料件的结合，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺通过激活羧基生成不稳定的中间体O-酰基异脲，然后中间体进一步与胺结合形成稳定的酰胺键。为了达到最佳的活化效果，发明人将反应的pH严格控制在5～6，在维持反应正常进行的同时避免胺基出现质子化导致的对中间体的亲和性降低。

一种细胞激活能量蛋白的制备方法，包括下述步骤：以茶氨酸乙酯及色氨酸甲酯盐酸盐合成形成的复合物或茶氨酸乙酯及色氨酸甲酯盐酸盐与β-酵母葡聚糖合成形成的复合物为肽载体，使用该肽载体对酪蛋白多肽及鲣鱼弹性蛋白肽进行包封。

优选的，一种细胞激活能量蛋白的制备方法，包括下述步骤：