[发明专利]治疗慢性复发性湿疹的中药组合物的特征指纹图谱及含量测定和质控方法

说明书

本发明涉及一种治疗慢性复发性湿疹的中药组合物的特征指纹图谱及主成分含量测定和质控方法。本发明采用超高效液相分析技术，以流动相以0.1％甲酸为流动相A，以乙腈为流动相B；线性梯度洗脱条件为：0～2.0min，7％B；2.0～5.0min，7％～15％B；5.0～10.0min，15％B；10.0～14.0min，15％～20％B；14.0～18.0min，20％B；18.0～20min，7％B；体积流速为0.1～0.3mL/min，检测波长为254nm、278nm或300nm，柱温为30℃～40℃，进样量为5μL。本发明的测定方法测定到的化学成分相对较多，基线平稳且分离度好，还具有稳定可靠、重现性好、精密度高等特点，可以更加全面地反映中药复方中所含化学成分的种类及含量，弥补了中药复方质量控制技术的不足，能够用于中药复方的质量控制。

技术领域

本发明属于中药检测技术领域，具体涉及一种治疗慢性复发性湿疹的中药组合物的特 征指纹图谱及主成分含量测定和质控方法。

背景技术

湿疹的防治是当今全球皮肤和过敏性疾病领域关注的热点、难点。中医对湿疹的治疗 积累了丰富的临床经验，有着良好的疗效，因此中医治疗湿疹临床有效方药具有新药开发 价值，但是对中药进行整体有效的质量控制一直是中药现代化主要制约因素之一。因此， 开展临床研究前，有必要建立复方中药新药的整体质控标准，是解决中药复方疗效可重复 性的关键环节之一。

中药复方具有多成分、多靶点作用特点，因此质量控制难度较大。而特征图谱是一种 综合的、多指标的质量控制手段，可以比较全面地反映复方制剂中所含的化学成分种类及 数量，传统的HPLC分离效果远不如超高效液相(UPLC)分析技术，后者可在更短时间 内对不同性质成分实现有效分离，实现定量质控，并具有成本相对低廉优势。

一种治疗慢性复发性湿疹的中药组合物，处方中含金银花、槐花、防风、地黄、白术、 苍术、薏苡仁、莪术8味中药，2020版中国药典对其药材液相质控指标成分包括：金银花测定绿原酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸(异绿原酸A)和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸(异绿原酸C)以及木犀草苷，槐花测定芦丁，防风测定升麻素苷和5-0-甲基维斯阿米醇苷，地黄测 定梓醇和地黄苷，薏苡仁测定其中甘油三油酸酯，苍术测定苍术素，但上述成分均为药材 中检测指标性成分，在其复方汤剂中是否含有需进一步验证，且不同性质成分涉及不同样 品制备方法、分析检测手段与分析方法，给中药复方质量标准制定带来挑战。

基于此，本发明首次采用超高效液相色谱法对一种治疗慢性复发性湿疹的中药组合物 中尽可能多成分进行分析确认，建立特征指纹图谱，对其主要成分进行含量测定，对其中 尽可能多成分进行质量控制，满足复方多成分质量可控性需求，为复方制剂在生产过程中 建立经济、高效并且适合生产过程的质量控制方案提供科学的参考依据。

发明内容

针对现有技术中中药复方质量控制技术不足的缺点，本发明提供了一种治疗慢性湿疹 中药组合物的特征指纹图谱及主成分含量测定和质控方法。

为实现上述目的，本发明采用的主要技术方案包括：

第一方面，本发明提供了一种治疗慢性复发性湿疹的中药组合物的超高效液相(UPLC) 特征指纹图谱建立方法，其包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：

a)复方冻干粉末样品的制备：按处方比例称取多个批次的防风、金银花、槐花、莪术、 生地、白术、薏苡仁、苍术饮片，分别加入水，煎煮，浓缩，制备成多个批次的复方冻干粉末样品；

b)供试品溶液的制备：精密称取20～50mg多个批次的复方冻干粉末样品，置于量瓶中，分别加入有机溶剂1～2.5mL，超声充分溶解，再加入相同体积1～2.5mL超纯水， 超声混匀，制成不同批次的供试品溶液；