[发明专利]抑制蜜蜂Rho1基因的siRNA及其应用

说明书

抑制蜜蜂Rho1基因的siRNA及其应用，本发明提供了可明显抑制Rho1基因转录的siRNA，通过向产卵蜂王腹部注射该siRNA可稳定获得小体积的蜜蜂受精卵，解决了现有的科研活动中难以大量获取小体积蜜蜂受精卵的难题。

技术领域

本发明涉及生物技术，具体涉及抑制蜜蜂Rho1基因的siRNA及其应用。

背景技术

蜜蜂不仅具有重要经济价值和生态价值，也是生物学研究的重要模式生物。蜜蜂作为一种真社会性昆虫具有精细的社会结构和丰富的社会行为，尤其是存在生殖分工，即雌性蜂王专司产卵，而后代的哺育工作由其它雌性共同承担。生殖是生活史的重要一环，是为繁衍后代而进行的“投资”行为，而自然选择总是青睐那些能够优化“成本”和“效益”平衡，提高自身在生态位中适应性的物种和个体。因此，生殖投资要求母体能够根据外部环境条件和自身的生理状态动态调整分配给后代的资源以达到后代以及母体自身适应性的最大化。在蜂群中，蜂王和工蜂在生殖行为中既相互配合、又相互影响，共同保证蜂群的生存和发展，为社会性生物的生殖调控研究提供了很好的模型。

蜂王在体积较大的巢房中产下的受精卵明显比在较小的巢房中产下的卵大，在相同的饲养条件下大卵发育成的蜜蜂体重更重，并且有更多的卵巢管。探明大卵和小卵在分子水平上的差异以及发育成的蜜蜂在生理机能上的差异将对蜜蜂健康养殖具有现实的指导意义。然而，如何获得稳定的获得大量的、具有大小显著差异的蜜蜂受精卵从而为后续研究提供生物材料这一问题尚未解决。

发明内容

本发明的目的在于一种抑制蜜蜂Rho1基因的siRNA，用于稳定获得小体积蜜蜂受精卵。

为实现上述发明目的，本发明的技术方案具体如下：

抑制蜜蜂Rho1基因的siRNA，所述siRNA包括下列四条序列：

S1 siRNA，其正义链为：5'-GGCAGCCAUUAGAAAGAAATT-3'，其反义链为5'-UUUCUUUCUAAUGGCUGCCTT-3'；

S2 siRNA，其正义链为5'-GCCCAAAUGUGCCCAUUAUTT-3'，其反义链为5'-AUAAUGGGCACAUUUGGGCTT-3'；

S3 siRNA，其正义链为5'-GGAAGGUAUUAGGGAAGUATT-3'，其反义链为5'-UACUUCCCUAAUACCUUCCTT-3'；

S4 siRNA，其正义链为5'-GAUGUUGGCUCCUAUAAUUTT-3'，其反义链为5'-AAUUAUAGGAGCCAACAUCTT-3'。

本发明还提供了上述的抑制蜜蜂Rho1基因的siRNA在调控蜜蜂受精卵大小中的应用。

优选的，所述应用是减小蜜蜂受精卵体积。

本发明还提供了一种小体积蜜蜂受精卵的获取方法，包括：在产卵蜂王的第4-5腹节注射权利要求1中所述4种siRNA的混合物，待产卵蜂王苏醒后放回原蜂群继续产卵即得小体积蜜蜂受精卵。

优选的，包括：将产卵蜂王从蜂群中取出，用二氧化碳麻醉产卵蜂王，在产卵蜂王的第4-5腹节注射权利要求1中所述4种siRNA的混合物，待产卵蜂王苏醒后放回原蜂群，在产卵蜂王产卵后，收集所产新卵即得小体积蜜蜂受精卵。

优选的，所述4种siRNA的混合物的注射量是1-3μl/只。

优选的，所述混合物是4种siRNA的等量混合物，4种siRNA等量混合物的终浓度是1μg/μl。

与现有技术相比，本发明的有益技术效果：

本发明提供了可明显抑制Rho1基因转录的siRNA，通过向产卵蜂王腹部注射该siRNA可稳定获得小体积的蜜蜂受精卵，解决了现有的科研活动中难以大量获取小体积蜜蜂受精卵的难题。