[发明专利]一种鼠李糖乳杆菌改善记忆损伤的新用途

说明书

本发明公开了一种乳酸菌株的新用途，属于益生菌的新功能用途的技术领域。目前，益生菌产品及其健康调节效应受到了人们的普遍关注。特异的益生菌株通常具有调节肠道菌群、调节免疫、抑制病原菌侵染等功能。部分益生菌株具有神经调节效应，即通过不同的途径影响到脑等中枢神经系统的功能，从而改善人们的精神健康。本发明对鼠李糖乳杆菌GR‑1对空间记忆损伤的干预能力进行了检测，发现这株益生菌的孕期摄入可以显著预防铅暴露所致的学习记忆损伤。这是首次发现单株益生菌能够通过母代摄入的方式预防子代学习记忆损伤，对拓展益生菌的应用领域、维护发育期机体的精神健康具有相应的应用价值。

技术领域

本发明属于益生菌株新用途的技术领域，尤其涉及一种鼠李糖乳杆菌GR-1改善铅致学习记忆损伤的新用途。

背景技术

随着现代社会压力的增大及环境暴露、食品安全等原因，目前人群中记忆损伤或缺陷出现了上升的趋势。其中，慢性铅暴露是一种重要的学习记忆损伤模型。铅作为一种环境中存在的难以降解的重金属污染物，主要通过摄食( 食物) 和呼吸进入血液循环，最终沉积在软组织和骨骼中，对血液、骨骼、泌尿、免疫和神经等多种系统造成破坏，对儿童和动物中枢神经系统的发育具有极大的毒性。铅会导致机体抗氧化防御系统受到抑制，促使体内产生大量活性氧，并导致脂质过氧化和氧化性DNA损伤，最终损害机体健康。学习和记忆认知障碍是铅中毒儿童的主要临床症状。铅暴露通过影响突触功能可塑性，即长时程增强或长期抑制，从而影响动物的学习记忆能力。

益生菌是一类可赋予宿主有益健康效应的活体微生物。益生菌通过调节宿主黏膜与系统免疫功能或调节肠道内菌群平衡，促进营养吸收保持肠道健康，从而产生有利于健康的单微生物或组成明确的混合微生物。有研究表明益生菌是通过调节宿主内部菌群组成或通过调节宿主的免疫功能，达到维护宿主肠道健康和促进营养吸收的目的。对益生菌效应谱的解析和探究为益生菌制剂产品的研究和开发提供了理论基础，也不断揭开了益生菌强大的益生作用的奥秘，在国际上引起了广大科学家和消费者的强烈关注。

益生菌的益生效应具有显著的菌株特异性，即使同种的不同菌株在效应模式和作用途径上也有显著的差别。鼠李糖乳杆菌GR-1是一株分离自人泌尿生殖道的乳酸菌，但该菌同样可以经口摄入而调节肠道平衡，因此是一株典型的益生菌。目前对GR-1的益生功能的解析主要在于对病原菌的竞争性抑制作用和免疫调节作用，关于其是否具有神经调节效应目前尚不得而知。

发明内容

本发明提供了一种鼠李糖乳杆菌GR-1预防学习记忆损伤的新用途。

本发明是通过以下步骤的技术方案得以实现：

所用菌株为鼠李糖乳杆菌GR-1（Lactobacillus rhamnosus GR-1）,所使用的培养基为MRS培养基。

（1）菌株活化

配置好的液体培养基用高压蒸汽灭菌锅于121℃条件下灭菌20 min。待液体培养基冷却至室温后，吸取50μL 冷冻保藏的菌种，接入液体培养基，然后将液体培养基置于37℃ 恒温培养箱中培养过夜，之后取200 μL菌种发酵液接入相应的液体培养基中，进行传代培养。

（2）菌株的暴露

将活化后的GR-1菌株收集下来后，以10⁹CFU^//只/天的剂量灌胃SD大鼠。灌胃从雌鼠与雄鼠同笼后一周后开始进行，一直持续到产前，即持续整个孕期。子代出生后，在哺乳期（出生至出生后21天）喂饲含醋酸铅的水，使得每天的暴露剂量为125 ppm, 直至断奶时止。随后正常喂养大鼠至出生后第八周并开始行为学实验。

此外，通过GR-1的哺乳期暴露和断奶后暴露（出生后21天至行为学实验止）判断不同处理模式下对学习记忆的改善作用。

(3) 行为学实验