[发明专利]一种金针菇的选育方法

说明书

本发明涉及食用菌育种技术领域，具体涉及一种金针菇的选育方法，包括：杂交亲本的选择，单核菌株的获取，单核菌株间的杂交配对，以及杂交菌株的筛选与出菇验证。本发明是通过不同遗传背景的单核菌种的相互融合，将两亲本菌株的基因进行遗传重组，从而获得同时具有两亲本优良性状的金针菇。

技术领域

本发明涉及食用菌育种技术领域，具体涉及一种金针菇的选育方法。

背景技术

金针菇，隶属于担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、口蘑科、金钱菌属,别称冬菇、毛柄金钱菌、朴菇等，口感脆嫩，有较高的营养价值和显著的保健功能，具有广阔的开发利用前景。

金针菇培养周期较短，生长同步性较好，极为适宜规模化工厂化生产，但金针菇的工厂化栽培也存在一定的技术瓶颈，菌种常出现适应性差，产量低的问题。

发明内容

本发明提供一种金针菇的选育方法，以解决背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种金针菇的选育方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一：选取遗传背景不同的金针菇菌种，作为杂交的两个亲本菌种。即两亲本优良性状互补，且将两个亲本菌种同时接种在同一个培养皿中，培养基为寒天培养基，在18℃下培养8天，切取菌块，将两个亲本菌块接种在同一个具有寒天培养基的培养皿中，继续在18℃下培养，可出现拮抗反应；

步骤二：选取步骤一中亲本发育完全的子实体菌盖部分，挑取直径8.5mm-10.5mm的菌盖用于担孢子的收集；摘取菌盖后，用75％的酒精对菌盖进行擦拭消毒，因为含有杂菌，不消毒会收集失败，切掉菇柄，将菌盖置于已灭菌的玻璃培养皿中，将培养皿静置8-10小时，揭去菌盖，即可收集到菌盖喷射的孢子印；

步骤三：准备已灭菌的装有无菌水的离心管5-10支，选取步骤二得到的孢子印进行冲洗，冲洗后得到金针菇孢子悬浮液，将金针菇孢子悬浮液转移至无菌水中进行稀释，稀释到浓度为2.5×10²个/mL，取稀释后的金针菇孢子悬浮液，转移到装有PDA培养基的培养皿中，进行涂布稀释，再在黑暗，18℃条件下培养4-5天，获得由单个担孢子长出的单核菌落；

步骤四：将单核菌落转接至含有培养基的试管中，在黑暗18℃条件下培养12天，对单核菌株进行筛选，选择生长速度快，粉孢子少，菌丝均匀的单核菌株用于后续的杂交(两个亲本菌种均采用步骤二-步骤四的方法培养)；

步骤五：将步骤四得到的两个亲本菌种的单核菌株分别在培养皿中培养10天，刮掉菌落表面菌丝，在菌落边缘进行打孔，后将两株单核菌株的菌块转移至同一培养皿中，相距1.5cm，在18℃，黑暗条件下进行培养9-10天，对菌丝进行镜检，选择菌丝上有锁状联合结构的组合，取中间突起部分切割菌块，转移到新的培养基中继续培养，获得杂交菌株；

步骤六：将步骤五中得到的杂交菌株在17℃，黑暗条件下，培养9天，刮去表面菌丝，在菌丝尖端位置呈环状打孔，打孔后取菌块放入液体培养基中培养，获得金针菇液体菌种；

步骤七：将金针菇液体菌种接种于栽培瓶中，每瓶接种25-30ml,在18℃，黑暗条件下进行菌丝培养，在5-8℃条件下进行出菇培养，在菌丝培养和出菇培养中测定其农艺学性状与明确其栽培模式，筛选出符合生产需求且产量、质量均优于亲本的菌种。

进一步，步骤一中判断亲本菌种间的遗传背景差异的步骤为：观察成熟菇体，选取农艺学性状能够优势互补的两品种作为亲本，并对这两个亲本菌种进行菌落培养8天后，用打孔器在距离菌丝尖端位置打孔，打孔后取两个亲本菌块接种于同一培养皿，培养基为寒天培养基，相距1.5cm，在黑暗，18℃条件下进行培养，待长至相交部位，观查两菌落之间是否有拮抗线产生，有拮抗线产生表明两亲本之间遗传背景差异大。