[发明专利]基于Cardipy染料的溶酶体靶向荧光探针及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 202210295703.6 | 申请日： | 2022-03-24 |
| 公开（公告）号： | CN114539268B | 公开（公告）日： | 2022-12-09 |
| 发明（设计）人： | 孙远强;孙朋娟;李朝辉 | 申请（专利权）人： | 郑州大学 |
| 主分类号： | C07D487/16 | 分类号： | C07D487/16;C09K11/06;G01N21/64 |
| 代理公司： | 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 | 代理人： | 冉珊敏 |
| 地址： | 450001 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 cardipy 染料 溶酶体 靶向 荧光 探针 及其 制备 方法 应用 | ||
1.基于Cardipy染料的溶酶体靶向荧光探针，其结构式如下：
。
2.权利要求1所述的溶酶体靶向荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤为：
（1）将2,4-二甲基吡咯和氢氧化钾溶解于干燥的DMSO中，在氮气流保护下室温搅拌后加入二氯甲烷在继续搅拌得到白色固体即化合物2；
（2）向化合物2的甲苯溶液中加入三光气所得混合溶液回流5 h，经快速柱色谱分离混合物得白色固体3；
（3）将化合物3的无水THF溶液加入到邻甲基溴苯和正丁基锂的混合溶液中反应，反应溶液经纯化后得化合物4；
（4）化合物4在冰醋酸与哌啶催化下进一步与对羟基苯甲醛反应，反应结束后除去有机溶剂后将剩余的物质溶解在HCl和THF的1:1混合物中进行阴离子交换，所得混合溶液的有机层经萃取、干燥蒸发、纯化得到红色固体。
3.根据权利要求2的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中2,4-二甲基吡咯、氢氧化钾和二氯甲烷的物质的量比为2:3:1.5。
4.根据权利要求3的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中化合物2和三光气的物质的量比为5:2。
5.根据权利要求4的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中化合物3、邻甲基溴苯和正丁基锂的物质的量比为0.3:1:1。
6.根据权利要求5的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中化合物4和对羟基苯甲醛的物质的量比为1:3。
7.权利要求1所述的荧光探针在非疾病诊断目的的可视化检测溶酶体中的应用。
8.权利要求1所述的荧光探针在非疾病诊断目的的监测活细胞中溶酶体内pH波动中的应用。
9.根据权利要求7或8的应用，其特征在于，步骤为：将2 μM探针和LysoTrackerTM DeepRed共同孵育待测细胞15-20min，通过激光共聚焦成像观测探针在待测细胞中的分布。
10.根据权利要求7或8的应用，其特征在于，步骤为：将2 μM探针与待测细胞共同孵育15-20min，通过激光共聚焦成像观测探针荧光强度的变化。
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