[发明专利]一种景观型苔藓孢子规模化诱变筛选方法

说明书

本发明提供了一种景观型苔藓孢子规模化诱变筛选方法，属于生物工程技术领域。本发明以景观型苔藓孢子为材料，利用EMS诱变剂溶液浸泡处理苔藓孢子的方式进行诱变，通过对其突变体表型的观察及数据化比较，来筛选景观型苔藓突变体。在实验室中4个月就能获得稳定遗传的景观型新品种，极大地缩短育种时间，更适用于苔藓造景及具有复杂图案的立体绿化造景，对景观型苔藓植物的新性状培育具有重要的指导意义。经本发明方法获得的突变体株型优美，有较高欣赏价值，有景观型苔藓应用潜力，且突变体生长发育正常，能正常完成生活史。另外，本发明方法操作简单，鉴定结果准确、稳定可靠，可以实现突变体批量筛选、快速检测，突变效率高。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，尤其涉及一种景观型苔藓孢子规模化诱变筛选方法。

背景技术

在世界范围内苔藓植物的种类繁多，约有23000种，其中包括约15000种藓类，8000余种苔类和100余种角苔类。苔藓植物大部分个体微小，结构较为简单，其形态各异，利用苔藓的生长特性结合园林园艺造景艺术，能够创造极富有自然美的新型苔藓景观。此外，苔藓适应性较强，基本无病虫害，青翠常绿，生长整齐且无需修剪，造景后的景观能保持较长时间。苔藓植物作为新兴的景观植物，由于其独特的形态特征，带来新的观赏感受的同时也有区别于其他植物的特有的应用前景。但目前苔藓植物市场上缺少良好的景观苔藓新品种，并且缺乏完善的种植培养体系，在经济利益的驱使下，大量野生苔藓被过度利用，这使苔藓植物生存与苔藓植物资源的可持续利用受到严重威胁。而适合于商业苔藓只有极少的一部分，深入挖掘苔藓资源，对现有苔藓品种进行改造，选育更加适合商业应用的苔藓新品种对野生苔藓种质资源多样性的保护以及苔藓产业的健康快速发展具有重要的意义。

小立碗藓(Physcomitrellapatens)属于葫芦藓科，小立碗藓属，分布于欧洲、亚洲、非洲及大洋洲，中国湖南省张家界地区有分布。小立碗藓植物体矮小，黄绿色，有光泽，稀疏丛集。其茎细而短。叶片呈卵形或披针形，茎基部的叶较小，中肋单一、细长。小立碗藓目前苔藓市场上已有应用，常作为种植在苔藓墙的“山石”、“平原”、“瀑布”等周围，作为主景或点缀。

甲基磺酸乙酯(EMS)是一种应用十分广泛的化学诱变剂，它的诱变效率高、诱变效果好。EMS诱变在植物育种上的应用，不仅可以打破传统的植物育种方式，获得的突变群体对培育植物新品种和丰富植物种质资源具有重要意义。目前本领域主要以EMS诱变植物种子为主，尚未有采用EMS诱变苔藓孢子的有关研究，而且苔藓是园艺、景观植物，如何快速、规模化获得性状优良的苔藓突变体材料，以满足市场需求，目前还有没有一种合适的方法。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种景观型苔藓孢子规模化诱变筛选方法，能够极大的缩短育种时间，规模化获得性状优良的更适用于苔藓造景及具有复杂图案的立体绿化造景的苔藓突变体材料。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种景观型苔藓孢子规模化诱变筛选方法，包括如下步骤：采用浓度为2％-4％的EMS诱变剂溶液浸泡处理苔藓孢子，进行诱变；待诱变后的孢子发育出原丝体后，进行单独培养，对培养获得的突变体进行表型观察及数据化比较，筛选与野生型在表型方面有明显差异性的材料。

优选的，所述EMS诱变剂溶液浸泡处理的时间为60min-90min。

优选的，所述苔藓包括小立碗藓。

优选的，所述苔藓孢子的获得方法包括如下步骤：将苔藓配子体移至基质培养，光周期8h昼/16h夜，光强60-80μmol photons m^-2s^-1，培养温度16℃，60d-90d诱导出苔藓孢子。

优选的，还包括如下步骤：筛选获得与野生型在表型方面有明显差异性的材料后，对所述材料进行继代处理，获得继代突变体，对继代突变体进行表型观察及数据化比较，筛选与野生型在表型方面有明显差异性的材料。