[发明专利]一种抗前胃泌素释放肽单链抗体及其制备方法与用途

权利要求书

1.一种抗前胃泌素释放肽单链抗体，其特征在于：

所述的单链抗体包含重链可变区V_H和轻链可变区V_L，并可选的包含用于连接重链可变区V_H和轻链可变区V_L的连接肽，

所述的重链可变区V_H包含HCDR1、HCDR2、HCDR3，三者的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.5-7所示，

所述的轻链可变区V_L包含LCDR1、LCDR2、LCDR3，三者的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.8-10所示。

2.根据权利要求1所述的单链抗体，其特征在于：所述的重链可变区V_H的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述的轻链可变区V_L的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

3.根据权利要求1或2所述的单链抗体，其特征在于：所述的连接肽为(Gly₄Ser)₃。

4.根据权利要求1所述的单链抗体，其特征在于：所述的单链抗体的氨基酸序列如SEQID NO.1所示。

5.一种根据权利要求1-4之一所述的单链抗体的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括如下步骤：

(1)将表达所述的抗前胃泌素释放肽单链抗体的核苷酸序列重组至原核表达载体中，构建获得表达抗前胃泌素释放肽单链抗体的重组表达载体，导入基因工程菌中构建重组工程菌；

(2)将步骤(1)得到的重组工程菌进行发酵培养，对离心获得的菌体进行分离纯化，获得纯化的所述的抗前胃泌素释放肽单链抗体。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的核苷酸序列如SEQID NO.2所示。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的原核表达载体选自pET-28a(+)、pET-32a(+)、pGEX-4T-1或pE-SUMO。

8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的基因工程菌选自大肠杆菌BL21(DE3)、BL21、BL21(AI)、BL21(DE3)PLySs或Rosetta(DE3)。

9.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，

所述的发酵培养的过程中加IPTG过夜诱导培养，

所述的分离纯化是收集离心菌体，超声破碎后利用镍金属螯合层析柱进行蛋白纯化。

10.根据权利要求1-4之一所述的单链抗体用于制备诊断或治疗肺癌的试剂或药物的用途。