[发明专利]γδT细胞的NKG2D/VSTM3作为检测急性髓性白血病标志物中的应用

说明书

本发明提供了γδT细胞NKG2D/VSTM3作为检测急性髓性白血病标志物中的应用，属于疾病的诊断和预后评估技术领域。本发明通过对分析AML患者外周血γδT细胞功能亚群中免疫效应分子NKG2D和抑制性分子VSTM3的表达情况，探讨治疗后AML临床疗效及状态的实验室指标，本发明是基于目前存在的问题而提出的新的解决方案，具有较好的创新性和科学研究意义。

技术领域

本发明属于疾病的诊断和预后评估技术领域，具体涉及γδT细胞NKG2D/VSTM3作为检测急性髓性白血病标志物中的应用。

背景技术

急性髓性白血病(Acute myeloid leukemia，AML)是一组起源于造血干细胞的恶性克隆增殖性疾病，具有高度异质性，是成人中最为常见的白血病类型。目前AML的治疗主要包括诱导缓解治疗和缓解后巩固治疗。诱导缓解治疗主要使用(1)阿糖胞苷联合蒽环类药物；(2)含中大剂量Ara-C的诱导治疗方案；(3)三尖杉酯碱联合标准剂量Ara-C+蒽环类药物方案对AML患者进行治疗，使其获得完全缓解(complete remission，CR)；缓解后巩固治疗的目的是清除体内的微小残留病灶)以及预防疾病的复发，主要包括化学药物治疗和造血干细胞移植。在过去几十年里，随着治疗手段不断改进，AML患者的长期无病生存率和完全缓解率有了很大提高，但对于老年AML患者和部分无移植条件的年轻患者，特别是其伴有不良染色体或基因异常改变，常面临着无法耐受化疗药物及化疗诱导缓解后复发率较高等问题。对于这类患者，新的治疗方案如T细胞过继性免疫治疗有望延长患者的生存时间，具有良好的应用前景。

gamma delta T细胞(γδT)亚群的异质性决定了其功能的多样性。表明激活的γδT细胞可以通过多种效应机制针对肿瘤细胞发挥杀伤作用，可通过NKG2D(natural killergroup 2 member D，NKG2D)信号通路发挥细胞毒作用，介导肿瘤细胞溶解。NKG2D属于NKG2家族的II型跨膜蛋白，以链间二硫键的同源二聚体形式表达，是在所有NK细胞、γδT细胞和CD8⁺T细胞均有表达的活化性受体。由杀伤细胞凝集素样受体家族成员1基因编码，位于12号染色体上。多种证据显示肿瘤细胞可诱导NKG2D表达下调而抑制性受体上调，从而抑制免疫细胞的活化从而造成肿瘤免疫逃逸。

肿瘤发生发展过程中，由于肿瘤抗原的持续刺激，T细胞常表现为耗竭表型，主要表现为细胞表面抑制性受体表达增加，细胞因子及免疫调节细胞数量改变，从而引起肿瘤免疫逃逸。此外，耗竭性T细胞常同时伴有T细胞趋化、粘附、迁移的相关基因表达改变，转录因子表达谱的改变及代谢功能缺陷等特征。耗竭性T细胞功能丢失是一个逐渐发展的过程，随着耗竭严重程度的增加，T细胞表面抑制性受体的数量和种类增多。VSTM3是近年来新发现的一个免疫抑制分子，其在T细胞表面的高表达可抑制T细胞发挥免疫功能。VSTM3基因位于人类第16号染色体，VSTM3蛋白结构由3部分组成，即位于细胞外的胞外IgV结构域、I型跨膜蛋白构成的胞膜跨膜区，以及细胞内由ITIM和免疫球蛋白酪氨酸尾(immunoglobulintyrosine tail,ITT)样基序构成的胞内信号区。VSTM3是主要表达于大部分T细胞和NK细胞的I型跨膜蛋白，可通过下调T细胞受体α链的表达，降低T细胞内部信号转导幅度，间接抑制T细胞的活化。

白血病患者体内存在着一定程度的T细胞免疫功能缺陷，如何充分发挥γδT细胞的抗肿瘤免疫效应，是获得有效的抗AML的γδT细胞过继性免疫治疗策略的关键。目前，尚无关于AML患者外周血γδT细胞功能亚群中免疫效应分子NKG2D和抑制性分子VSTM3的表达情况与AML发病和治疗后AML临床疗效及状态有直接关联的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供γδT细胞NKG2D/VSTM3作为检测急性髓性白血病标志物中的应用，对AML发病的诊断以及治疗后AML临床疗效及状态的判断和临床治疗方案的调整具有重要意义。

本发明提供了γδT细胞的NKG2D/VSTM3作为检测急性髓性白血病标志物中的应用。