[发明专利]miR34a抑制剂在治疗刚地弓形虫感染致不良妊娠中的应用

说明书

本发明属于生物医药技术领域，本发明公开了一种miR‑34a抑制剂在制备治疗刚地弓形虫所致不良妊娠药物方面的应用。本发明的实施例还提供一种治疗刚地弓形虫所致不良妊娠药物，其特征在于，至少包括miR‑34a抑制剂，miR‑34a抑制剂增加Foxp3表达。优选的，所述药物中还包括医学上可接收的其他试剂。本发明的实施例另外还提供一种用于检测刚地弓形虫所致不良妊娠的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒内包括用于监测Foxp3表达的试剂。通过本实施例的验证实验，可以看出miR‑34a抑制剂和Foxp3‑3'UTR联合转染组Foxp3的荧光活性升高，验证了miR‑34a抑制剂可以有效增加Foxp3表达，从而，为治疗刚地弓形虫所致不良妊娠提供了一种新的方向和药物可能。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及miR34a抑制剂在治疗刚地弓形虫感染致不良妊娠中的应用。

背景技术

现有技术中对miR34a抑制剂在治疗刚地弓形虫感染致不良妊娠中的运用没有得到有效开拓，是本领域长期以来一直研究的课题。

刚地弓形虫（Toxoplasma gondii, T. gondii）是重要的机会致病性原虫。免疫力正常的个体感染弓形虫后多呈隐性感染状态。对于免疫功能损伤或免疫缺陷患者，如艾滋病、器官移植及恶性肿瘤患者，弓形虫感染是导致死亡的重要原因。孕妇感染可影响胎儿的发育，导致流产、畸胎、死胎、早产、出生缺陷等先天性弓形虫病。

正常妊娠时，母儿处于一种特殊的免疫耐受状态，其复杂的机制为异体胎儿提供了保护性免疫应答，其中，由调节性T细胞（regulatory T cells, Tregs）介导的母儿免疫耐受至关重要。Tregs是一种特殊的T细胞亚群，通过细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4（CTLA-4）和程序性细胞死亡蛋白1（PD-1）等介导免疫抑制功能，产生抑制性细胞因子TGF-β，IL-10以及其他Th1/Th17炎性细胞因子，可促进免疫耐受和内环境稳定，防止自身免疫反应。此外，Tregs激活上调共免疫抑制分子T细胞免疫球蛋白黏蛋白3（Tim-3）或淋巴细胞活化基因3（LAG-3）表达，增强免疫调节能力，从而促进母胎免疫耐受。研究发现，将Tregs从正常妊娠小鼠过继转移到易流产小鼠可显著降低流产率，表明Tregs是维持成功妊娠的必不可少的因素之一。

转录因子叉头盒蛋白P3（forkhead box protein P3，Foxp3）是Tregs的关键转录因子，其表达直接决定Tregs功能。来源于Foxp3缺陷小鼠，其Tregs功能失调。人类缺乏Foxp3，会导致多种自身免疫性疾病，如IPEX综合征和多内分泌综合征。Foxp3启动子甲基化导致不明原因流产的患者外周血和蜕膜组织中Foxp3表达下调，不利于母胎免疫耐受的形成。Foxp3表达调控是一个涉及大量转录因子的复杂过程。转录因子SP1与Foxp3启动子结合，参与调节Foxp3启动子的活性。白细胞介素2受体（IL-2R）信号传导依赖于转录因子STAT3，直接影响Foxp3转录。TGF-β 信号诱导转录因子Smad3与活化T细胞的核因子（NFAT）结合，NFAT可作用于Foxp3增强子区域，从而诱导Foxp3表达。miRNAs作为调控转录后基因表达的关键因子，通过靶向切割mRNA或抑制翻译来影响基因表达。越来越多的证据表明，miRNAs在Foxp3的调控中起着不可或缺的作用。研究发现，白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）可以增强miR-34a启动子的活性，以NF- κB/ p65依赖的方式抑制Foxp3表达。已经证明弓形虫通过SP1依赖机制抑制Foxp3启动子活性。然而，miRNAs是否参与了弓形虫抗原诱导的Foxp3表达抑制还没有报道。因此，本发明试图探讨miRNAs对弓形虫抗原抑制Foxp3表达的影响，并探讨其可能的分子机制。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在问题或不足，本发明提供一种miR34a抑制剂在治疗刚地弓形虫感染致不良妊娠中的应用。