[发明专利]一种基于少阳病方证的小柴胡汤类方指纹图谱的建立方法

权利要求书

1.一种小柴胡汤类方的高效液相色谱检测方法，其特征是，将小柴胡汤类方制成试品溶液，采用高效液相色谱对试品溶液进行检测，高效液相色谱检测过程中，色谱柱为watersC18柱，检测波长为253~255 nm和275~277 nm；

小柴胡汤类方包括大柴胡汤、小柴胡汤、柴胡芒硝汤、柴胡桂枝汤和柴胡龙骨牡蛎汤；

高效液相色谱采用的DAD串联的ELSD检测器；

高效液相色谱检测过程中，流速为0.5~1.5 mL/min，进样量为15~25 μL；

乙腈为流动相B，0.19~0.21%甲酸水为流动相A；

大柴胡汤的洗脱条件如下：

Time/min	流动相A	流动相B
0	97	3
15	88	12
35	76	24
45	76	24
50	70	30
60	65	35
75	35	65
76	5	95
85	5	95

小柴胡汤的洗脱条件如下：

Time/min	流动相A	流动相B
0	95	5
5	90	10
20	75	25
25	70	30
30	70	30
40	60	40
50	35	65
51	5	95
60	5	95

柴胡芒硝汤梯度洗脱条件如下：

Time/min	流动相A	流动相B
0	95	5
5	90	10
20	75	25
25	70	30
30	70	30
40	60	40
50	35	65
51	5	95
60	5	95

柴胡桂枝汤梯度洗脱条件如下：

Time/min	流动相A	流动相B
0	95	5
5	90	10
20	75	25
30	70	30
35	70	30
45	60	40
55	35	65
56	5	95
65	5	95

柴胡龙骨牡蛎汤梯度洗脱条件如下：

Time/min	流动相A	流动相B
0	95	5
5	90	10
20	75	25
30	70	30
35	70	30
45	60	40
55	35	65
56	5	95
65	5	95

大柴胡汤供试品溶液的制备：按伤寒论原方比例：柴胡24 g、黄芩9 g、芍药9 g、半夏12g、生姜15 g、枳实9g、大枣12枚、大黄6g；加入2400 mL水，小火煮取1200 mL，去除药渣，煮至600 mL；

小柴胡汤供试品溶液的制备：柴胡24 g、黄芩9 g、人参9 g、半夏12 g、甘草、生姜各9g、大枣12枚，加入2400 mL水，小火煮取1200 mL，去除药渣，煮至600 mL；

柴胡芒硝汤供试品溶液的制备：柴胡24 g，黄芩9 g，人参9 g，半夏12 g，炙甘草9 g，生姜9 g，大枣4枚，芒硝12 g，除芒硝外加入2400 mL水，小火煮取1200 mL，去除药渣，煮至600mL，加芒硝；

柴胡芒硝汤供试品溶液的制备：柴胡24 g，黄芩9 g，人参9 g，半夏12 g，炙甘草9 g，生姜9 g，大枣4枚，芒硝12 g，除芒硝外加入2400 mL水，小火煮取1200 mL，去除药渣，煮至600mL，加芒硝；

柴胡龙骨牡蛎汤供试品溶液的制备：半夏6 g、大枣6枚、柴胡12 g、生姜4.5 g、人参4.5g、龙骨4.5 g、桂枝4.5 g、茯苓4.5 g、大黄6 g、牡蛎4.5 g，除大黄外加入2400 mL水，煮取1200 mL加入大黄，小火煮沸后，去除药渣，煮至600 mL。