[发明专利]一种基于脐带干细胞和脐带干细胞外泌体的复合水凝胶、其制备方法及应用

权利要求书

1.一种基于脐带干细胞和脐带干细胞外泌体的复合水凝胶，其特征在于，所述的复合水凝胶包括脐带干细胞、脐带干细胞外泌体和凝胶材料，其中所述的脐带干细胞、脐带干细胞外泌体和凝胶材料的体积比为1：1：2～4。

2.根据权利要求1所述的复合水凝胶，其特征在于，所述的脐带干细胞、脐带干细胞外泌体和凝胶材料的体积比为1：1：3。

3.根据权利要求1或2所述的复合水凝胶，其特征在于，所述的凝胶材料由益多酚/透明质酸钠/壳聚糖溶液和β-GP水溶液制备而成，其中，所述的益多酚/透明质酸钠/壳聚糖溶液和β-GP水溶液的体积比为9：1。

4.根据权利要求3所述的复合水凝胶，其特征在于，所述的透明质酸钠的分子量为120-140万Da，所述的壳聚糖的N-脱乙酰度为95％以上。

5.一种权利要求1-4任意一项所述的复合水凝胶的制备方法，其特征在于，所述的制备方法为：

将脐带干细胞、脐带干细胞外泌体和凝胶材料混合并搅拌均匀，待脐带干细胞和脐带干细胞外泌体负载完成后，得到负载脐带干细胞和脐带干细胞外泌体的复合水凝胶，低温保存。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的凝胶材料的制备方法包括如下步骤：

1)益多酚/透明质酸钠/壳聚糖溶液的配置：将透明质酸钠用无菌水溶解，得到透明质酸钠溶液；向透明质酸钠溶液中添加壳聚糖，然后再添加益多酚，搅拌，得到益多酚/透明质酸钠/壳聚糖溶液；

2)β-GP水溶液的配置：将β-GP溶解于无菌注射用水中，搅拌，过滤，得到β-GP水溶液；

3)凝胶材料的配置：在低温环境下将得到的β-GP水溶液逐步滴加至益多酚/透明质酸钠/壳聚糖溶液中，搅拌，得到凝胶材料。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，所述壳聚糖的添加量为透明质酸钠溶液总质量的1-8％；所述益多酚的添加量为透明质酸钠溶液总质量的1-3％；所述的透明质酸钠溶液的质量分数为0.1-0.8％。

8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述脐带干细胞是通过采用含有脐静脉内皮细胞外泌体的培养基培养同源脐带间充质干细胞获得的；优选，所述脐带干细胞是用miR-525-3p过表达腺病毒感染修饰的miR-525-3p高表达脐带间充质干细胞。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述脐带干细胞外泌体是通过采用含有VCAM1试剂的培养基培养所述miR-525-3p高表达脐带间充质干细胞获得的。

10.一种权利要求1-4任意一项所述的复合水凝胶在制备治疗皮肤损伤药物方面的应用。