[发明专利]一种防治果蔬真菌病害的复合微生物菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种防治果蔬真菌病害的复合微生物菌剂，其特征在于，各组分按重量份数包括：长枝木霉菌液12-18份、侧孢短芽孢杆菌液10-15份、解淀粉芽孢杆菌液8-12份、载体20-25份、壁材25-35份、保护剂9-18份；

所述载体为高岭土；所述壁材为木薯淀粉与改性瓜尔胶的混合物；所述保护剂为β-环糊精、海藻酸钠和棕榈酸的混合物；所述长枝木霉菌液、侧孢短芽孢杆菌液、解淀粉芽孢杆菌液中有效活菌数分别不少于1.0×10¹⁰cfu/g。

2.根据权利要求1所述的防治果蔬真菌病害的复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂由以下步骤制备：(1)将长枝木霉菌、侧孢短芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌分别接种于对应的种子培养基中，25-32℃、180-250r/min摇床培养10-16h，得种子液；(2)将种子液分别用对应的发酵培养基中发酵培养，至各自菌液中有效活菌数不少于在1.0×10¹⁰cfu/g时，停止发酵，得菌液；(3)将菌液与载体混合均匀，使载体充分吸附菌体，得囊芯；(4)囊芯中加入壁材和保护剂，搅拌30-40min使其糊化，然后真空喷雾冷冻干燥，真空喷雾冷冻干燥结束后收集所得产物，得复合微生物菌剂。

3.根据权利要求2所述的防治果蔬真菌病害的复合微生物菌剂，其特征在于，所述长枝木霉菌的种子培养基为PDA培养基；所述侧孢短芽孢杆菌的种子培养基为LB培养基；所述解淀粉芽孢杆菌的种子培养基为NA培养基。

4.根据权利要求2所述的防治果蔬真菌病害的复合微生物菌剂，其特征在于，所述长枝木霉菌的发酵培养基配方为：马铃薯10g/L、葡萄糖12g/L、酵母浸膏2g/L、KH₂PO₄1g/L、FeSO₄0.6g/L、蒸馏水1L，PH为6.8-7.2、接种量4％；所述侧孢短芽孢杆菌的发酵培养基配方为：蛋白胨12g/L、葡萄糖8g/L、CaCl₂0.2g/L、MnSO₄0.2g/L、PH为7.0-7.2、接种量4％；所述解淀粉芽孢杆菌的发酵培养基配方为：豆粕12g/L；蛋白胨5g/L、葡萄糖3g/L、Na₂HPO₄·12H₂O0.4g/L、KH₂PO₄0.03g/L、CaCl₂0.1g/L、蒸馏水1L，PH为7.2-7.4、接种量3％。

5.根据权利要求1所述的防治果蔬真菌病害的复合微生物菌剂，其特征在于，所述木薯淀粉与改性瓜尔胶的质量比为5-7:8-10；所述保护剂中β-环糊精、海藻酸钠和棕榈酸的质量比为：4-7:15-18:3-5。

6.根据权利要求1所述的防治果蔬真菌病害的复合微生物菌剂，其特征在于，所述改性瓜尔胶由以下步骤制备：(1)将10g三聚氯氰和50g水，搅拌均匀，然后在0℃下滴加浓度10.5％的对氨基苯磺酸钠溶液100克，调节保持pH值为8.5，30min内，pH值无变化，反应结束，抽滤、洗涤、干燥后得瓜尔胶改性剂；(2)将瓜尔胶改性剂40g、异丙醇60g和重量浓度为35％的氢氧化钠溶液30mL混合均匀，然后喷洒在200g的瓜尔胶原粉上，55℃下搅拌反应3h，冷却至室温，调节pH值调至6.0，用气流干燥法干燥，获得阴离子瓜尔胶，所述阴离子取代度为0.42，1％水溶液25％粘度为6000cps，水不溶物含量为3.21％。

7.根据权利要求1-6所述的的防治果蔬真菌病害的复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂用于防治果蔬立枯病。

8.根据权利要求1-6所述的的防治果蔬真菌病害的复合微生物菌剂，其特征在于，其特征在于，所述复合微生物菌剂直接应用于果蔬的根和种子，具体应用方法为：将所述复合微生物菌剂与水混合制成浆液，将果蔬种子或幼苗根系沾取浆液，然后种植。