[发明专利]一种医用丝素蛋白胶原制备方法

说明书

本发明公开了一种医用丝素蛋白胶原制备方法。包括以下步骤：（1）制备溶液A；（2）制备溶液B；（3）制备溶液C；（4）混合。本发明的制备方法通过三层不同成分的胶原蛋白，首先是纯丝素蛋白，其次是经过甘油改性的丝素蛋白，再次是经过羟基磷灰石改性的丝素蛋白，通过分别、多次复合冻干，层与层之间相容较好；同时，采用羟基磷灰石改性，促进骨组织及血管生长；提高材料的机械强度，止血效果更佳；甘油作为改性溶剂，最后冻干之后用纯化水浸泡除去；而纯丝素蛋白胶原，后期更易吸收降解。

技术领域

本发明涉及一种医用丝素蛋白胶原制备方法，属于生物医药技术领域。

背景技术

蚕丝是熟蚕结茧时分泌丝液凝固而成的连续长纤维，属蛋白质纤维。也称天然丝，是一种天然纤维，也是人类利用最早的动物纤维之一。世界上最细最柔软的天然纤维，它的细胞结构最接近人体肌肤，所以其亲肤性能是所有纤维中最好的，被誉为“纤维皇后”。

天然蚕丝由丝素蛋白与丝胶蛋白组成，其中，由于丝胶蛋白具有免疫原性，故限制了蚕丝在生物组织工程领域的广泛应用，因此，蚕丝在生物组织工程领域的应用中，通常是以蚕丝脱胶的方法制备丝素蛋白。

丝素蛋白由于具有良好的生物相容性而被广泛应用于组织工程领域，如人工血管、人工神经、人工韧带等。但是，丝素蛋白本身并不是一种十全十美的生物材料，所以，在通常情况下，丝素蛋白需要与其他材料进行复合以制备复合材料，以满足组织工程领域不同研究及应用的需要。

目前上的医用蛋白胶原大多是以牛跟腱、牛骨等牛组织为原料，通过提纯、酶解、交联等工艺制备得到。

丝素蛋白产品主要制备成膜状材料，其改性也都通过静电纺丝工艺进行制备，改性生产成本高昂，生产效率低下，并不利于进行工业化生产。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供了一种医用丝素蛋白胶原制备方法，通过不同成分的胶原蛋白多次复合冻干得到的胶原蛋白，相比市面上的牛源胶原蛋白产品具有更低免疫性、组织亲和性强、止血性能好、组织修复功能强、生物降解性好等；是临床上使用的理想的止血修复生物材料，它可在体内自行降解吸收。

本发明是通过以下技术方案来实现的：

一种医用丝素蛋白胶原制备方法，包括以下步骤：

（1）制备溶液A：以生丝为原料，采用碳酸钠溶液在高温条件下进行处理，烘干后得到的蚕丝加入到溴化锂溶液中进行溶解，用水进行透析，离心后得到溶液A；

（2）制备溶液B：向溶液A中加入甘油，得到溶液B；

（3）制备溶液C：将溶液A与羟基磷灰石混合，得到溶液C；

（4）混合：将溶液A加入到模具中三分之一的位置，冻干；然后再加入溶液B到模具中三分之二的位置，冻干；最后加入溶液C至模具满，冻干得到成品。

所述的一种医用丝素蛋白胶原制备方法，所述碳酸钠的物质的量浓度为0.3-0.8mol/L。

所述的一种医用丝素蛋白胶原制备方法，所述高温条件为90-110℃。

所述的一种医用丝素蛋白胶原制备方法，所述溴化锂的物质的量浓度为9-10mol/L。

所述的一种医用丝素蛋白胶原制备方法，所述甘油的质量分数为40-60%。

所述的一种医用丝素蛋白胶原制备方法，所述乙醇溶液中乙醇的质量分数为40-60%。

所述的一种医用丝素蛋白胶原制备方法，羟基磷灰石为纳米级。

所述的一种医用丝素蛋白胶原制备方法，冻干得到的成品加入到过质量分数为2-4%的过氧化氢溶液中浸泡，再用水浸泡清洗，最后进行冷冻干燥。

所述的一种医用丝素蛋白胶原制备方法，冷冻干燥之后再采用钴-60辐照灭菌。