[发明专利]一种分离细胞外囊泡亚群的方法及其应用有效
| 申请号： | 202210169446.1 | 申请日： | 2022-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN114457002B | 公开（公告）日： | 2023-08-22 |
| 发明（设计）人： | 戴宗;殷文;柳思扬;邹小勇;杨扬;陈海填 | 申请（专利权）人： | 中山大学;中山大学附属第三医院 |
| 主分类号： | C12N5/00 | 分类号： | C12N5/00;C12N15/115 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 林德强 |
| 地址： | 510275 广东省广州市*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 分离 细胞 外囊泡亚群 方法 及其 应用 | ||
1.一种血浆中TCR-CD3二聚囊泡亚群的分离方法，其特征在于，包含以下步骤：
S1：通过双适配体修饰的纳米金对血浆样本中的EVs进行捕获；离心分离得纳米金-EVs复合物；
S2：将分离后的纳米金-EVs复合物与互补链C1反应后离心，将沉淀重悬，再与互补链C2反应后离心得到所述的TCR-CD3二聚囊泡亚群；所述双适配体修饰的纳米金的制备方法为：通过核酸适配体、连接链、C5形成双适配体结构，然后与纳米金粒子反应；
所述核酸适配体的序列为：
A1序列：5’-GCCGCGGGGTGGGTCTAGTGTGGATGTTTAGGGGGCGGCCTACATCATCTCGATGGC-3’；
A2序列：5’-GCCGCGGGGTGGGTCTAGTGTGGATGTTTAGGGGGCGGCATCTATGAAAAGTATCTA-3’；
所述连接链的序列为：
SH-T1：5’-SH-(CH2)6-TAGTAGAGCTACCGAAGCCATCGAGATGATGTAGTAGTTACCATCCTACCATTGATGATGTGTTGTTAGATACTTTTCATAGATTGTTGT-3’；
所述C5序列为：
5’-CATCATCAATGGTAGGATGG-3’；
所述互补链的序列为：
C1序列：5’-ACAACAATCTATGAAAAGTATCTAACAACA-3’；
C2序列：5’-TAACTACTACATCATCTCGATGGCTTCGGT-3’。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述双适配体的制备方法为：将SH-T1，A1，A2，C5混合放置于35～38℃反应1.5～2.5h。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述SH-T1，A1，A2，C5的摩尔比为（0.5～1.5）:（0.5～1.5）:（0.5～1.5）:1。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述双适配体的浓度为1～3μM；所述纳米金的浓度为4～6mg/mL。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述双适配体和纳米金的体积比为（0.5～1）:1。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述互补链C1和互补链C2反应的条件均为35～38℃反应1.5～2.5h。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中山大学;中山大学附属第三医院，未经中山大学;中山大学附属第三医院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202210169446.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种绿色建筑的污水处理设备
- 下一篇：一种建筑装修内墙均匀抹灰装置
