[发明专利]用于催化生产α-酮戊二酸的专用高温菌及催化生产方法有效
| 申请号: | 202210151384.1 | 申请日: | 2022-02-17 |
| 公开(公告)号: | CN114657088B | 公开(公告)日: | 2023-10-13 |
| 发明(设计)人: | 徐恒德;于有良;李建波;陈献忠;刘家印;贾庆福;许菲;于召涛 | 申请(专利权)人: | 大自然生物集团有限公司 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/02;C12P7/50;C12R1/465 |
| 代理公司: | 潍坊博强专利代理有限公司 37244 | 代理人: | 牟军平 |
| 地址: | 276511 山东省日*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 催化 生产 酮戊二酸 专用 高温 方法 | ||
1.用于催化生产α-酮戊二酸的专用高温菌,其特征在于:该菌是Streptomycessp.TC2303,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2021年12月27日,保藏编号为CCTCC NO:M20211682。
2.利用权利要求1所述的专用高温菌催化生产α-酮戊二酸的方法,其特征在于:以菌种Streptomyces sp.TC2303的发酵液对谷氨酸或其盐进行催化,前期催化温度控制在44.5~45.5℃,催化4.5~5.5小时后,将催化温度提升至55.5~56.5℃,并添加硫酸镁,再催化4.5~5.5小时后,将催化温度降低至48.5~49.5℃,催化生产至终点。
3.如权利要求2所述的利用专用高温菌催化生产α-酮戊二酸的方法,其特征在于:包括如下步骤:
S1、制备发酵液:
取菌种Streptomyces sp.TC2303单菌落于摇瓶发酵培养基中,44.5~45.5℃摇瓶培养,离心获得上清液,即发酵液;
S2、制备初始反应液:谷氨酸或其盐80~120g/L,硫酸锰0.05~0.15mmol/L,硫酸镁0.05~0.15mmol/L;
S3、将发酵液加入初始反应液中,控制谷氨酸氧化酶的最终酶活为1.3~1.7U/L,并调整反应液pH至6~7,温度控制在44.5~45.5℃,反应4.5~5.5小时;随后将温度提升至55.5~56.5℃,并添加硫酸镁至终浓度为1.5~2mmol/L,反应4.5~5.5小时后,再将温度降低至48.5~49.5℃,反应生产至终点。
4.如权利要求3所述的利用专用高温菌催化生产α-酮戊二酸的方法,其特征在于,步骤S1中,摇瓶发酵培养基如下:葡萄糖18~23g/L,酵母粉3~7g/L,硝酸铵2~4g/L,磷酸二氢钾0.5~1.5g/L,氯化钙0.05~0.15g/L,硫酸镁0.2~0.4g/L,硫酸亚铁0.005~0.015g/L,玉米浆0.5~1.5g/L,用盐酸或氢氧化钠调整pH到7~8,灭菌处理。
5.如权利要求3所述的利用专用高温菌催化生产α-酮戊二酸的方法,其特征在于,步骤S1中,44.5~45.5℃摇瓶培养24~48小时。
6.如权利要求3所述的利用专用高温菌催化生产α-酮戊二酸的方法,其特征在于:步骤S3中,从初始反应至反应终点的总反应时间不超过18小时。
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