[发明专利]一种人毛囊间充质干细胞与CGF组合物及其制备方法、应用

权利要求书

1.一种人毛囊间充质干细胞与CGF组合物，其特征在于，所述组合物包括人毛囊间充质干细胞、CGF和生理盐水，所述人毛囊间充质干细胞和所述CGF的体积比为1:(1～5)。

2.根据权利要求1所述的一种人毛囊间充质干细胞与CGF组合物，其特征在于，所述人毛囊间充质干细胞的浓度为1.0×10⁵～1.5×10⁶个/ml。

3.根据权利要求1所述的一种人毛囊间充质干细胞与CGF组合物，其特征在于，所述人毛囊间充质干细胞的浓度为1.0×10⁵～1.0×10⁶个/ml。

4.根据权利要求1所述的一种人毛囊间充质干细胞与CGF组合物，其特征在于，所述人毛囊间充质干细胞的浓度为1.0×10⁵～5×10⁵个/ml。

5.根据权利要求1所述的一种人毛囊间充质干细胞与CGF组合物，其特征在于，所述人毛囊间充质干细胞的浓度为2.5×10⁵～3.5×10⁵个/ml。

6.根据权利要求1所述的一种人毛囊间充质干细胞与CGF组合物，其特征在于，所述人毛囊间充质干细胞是通过采用条件培养基培养获得，所述条件培养基组分包括12v/v％血清替代物、7.5ng/ml表皮细胞生长因子、7ng/ml间充质干细胞外泌体和DMEM-F12培养基。

7.根据权利要求6所述的一种人毛囊间充质干细胞与CGF组合物，其特征在于，所述表皮细胞生长因子、所述间充质干细胞外泌体与所述人毛囊间充质干细胞同源。

8.一种如权利要求1所述的人毛囊间充质干细胞与CGF组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤(1)：获取毛囊根部，用生理盐水清洗后，继续用磷酸盐缓冲溶液冲洗，加入0.25％中性蛋白酶，37℃消化1h；

步骤(2)：酶消化后，接种于条件培养基中，培养条件为37℃、5％CO₂，每两天换液一次，待细胞密度为70％～80％时，即得到原代人毛囊间充质干细胞，再将原代人毛囊间充质干细胞进行扩增培养，得到人毛囊间充质干细胞；

步骤(3)：采集静脉血进行差速离心，所述差速离心的程序为：加速30s，速度达到2700rpm后离心2min，降到2400rpm后离心4min，再加速到2700rpm离心4min，3100rpm离心3min，最后减速30s停止，静置3min后取中间层的液体，得到CGF液体；

步骤(4)：将步骤(2)得到的人毛囊间充质干细胞与步骤(3)得到的CGF液体分别加入至生理盐水中，混合均匀后得到组合物。

9.一种如权利要求1所述的人毛囊间充质干细胞与CGF组合物的应用，其特征在于，所述组合物用于促进生发。

10.一种如权利要求1所述的人毛囊间充质干细胞与CGF组合物的应用，其特征在于，所述组合物通过采用水光针局部回输的方式进行应用。