[发明专利]再生蛋白REG1A单克隆抗体及其应用

说明书

本发明涉及再生蛋白REG1A单克隆抗体及其应用。该抗体包括重链和轻链，至少具有以下技术特征之一：i、重链包括重链CDR1，序列为VKQSH；ii、重链包括重链CDR2，序列为GGNVYNQKFKIKATLT；iii、重链包括重链CDR3，序列为PGTGYFDV；iv、轻链包括轻链CDR1，序列为RASQDISNYLN；v、轻链包括轻链CDR2，序列为YTSRLHS；vi、轻链包括轻链CDR3，序列为QQGHTLPRT。本发明的再生蛋白REG1A单克隆抗体能够有效检测再生蛋白REG1A水平，从而可以用以辅助诊断和治疗，以及预测疾病的发生和发展。

技术领域

本发明涉及一种再生蛋白REG1A单克隆抗体及其应用，属于生物医药技术领域。

背景技术

再生基因(regenerating gene,Reg)是从再生胰岛中分离出来的一种基因，近年来，越来越多的研究表明再生基因家族蛋白的异常表达与炎症反应及肿瘤等多种疾病密切相关。其中再生蛋白(REG1)最早在大鼠再生胰岛中发现，后被证实与一种能够抑制胰腺结石形成的胰石蛋白(PSP)为同一种蛋白质，统称为PSP/reg。REG1A位于2p12染色体上，编码166个氨基酸，属于钙依赖性凝集素超家族。REG1A蛋白主要由胰腺腺泡细胞合成、分泌，是胰腺外分泌产物，生理状态下REG1A以可溶性形式主要分布于胰腺、消化道组织、胰液及血液中。REG1A具有促进增殖，诱导再生等作用，主要参与炎症、糖尿病、胰腺炎、肿瘤等疾病的发生。已有多项研究表明，REG1A的水平变化与这些疾病的进展密切相关，其在疾病的早期诊断及治疗中的作用越来越受到人们的重视。

经检索发现，申请号CN202010856716.7、申请公布号CN111909266A的发明专利申请公开了及一种再生基因蛋白REG1A单克隆抗体的制备方法，包括以下步骤：⑴制备免疫接种的小鼠；⑵骨髓瘤细胞培养3-4天，得到培养后的小鼠骨髓瘤细胞；⑶将REG1A蛋白溶解向免疫接种的小鼠腹腔接种免疫，并且获得脾细胞，经分散脾细胞得到脾细胞沉淀物；⑷培养后的小鼠骨髓瘤细胞离心得到骨髓瘤细胞沉淀物；⑸用DMEM高糖培养液分别悬浮脾细胞沉淀物、骨髓瘤细胞沉淀物并混合，经离心得到沉淀物；⑹沉淀物离心、悬浮，即得融合细胞；⑺将融合细胞进行培养、测定，确定杂交瘤细胞；⑻单抗的筛选分离；⑼大量制备单克隆抗体：将杂交瘤细胞系按常规方法进行单克隆抗体生产即得。然而，该技术方案并未能提供明确的单克隆抗体序列。

发明内容

本发明的主要目的是：克服现有技术存在的问题，提供一种再生蛋白REG1A单克隆抗体，能有效检测血清和组织中的REG1A；同时还提供该抗体的应用。

本发明解决其技术问题的技术方案如下：

一种再生蛋白REG1A单克隆抗体，所述抗体包括重链和轻链，其特征是，所述抗体至少具有以下技术特征之一：

i、所述重链包括重链CDR1，其氨基酸序列为VKQSH；

ii、所述重链包括重链CDR2，其氨基酸序列为GGNVYNQKFKIKATLT；

iii、所述重链包括重链CDR3，其氨基酸序列为PGTGYFDV；

iv、所述轻链包括轻链CDR1，其氨基酸序列为RASQDISNYLN；

v、所述轻链包括轻链CDR2，其氨基酸序列为YTSRLHS；

vi、所述轻链包括轻链CDR3，其氨基酸序列为QQGHTLPRT。

优选地，所述抗体至少具有以下技术特征之一：

i、所述重链包括重链CDR1，其氨基酸序列为VKQSH；所述重链包括重链CDR2，其氨基酸序列为GGNVYNQKFKIKATLT；所述重链包括重链CDR3，其氨基酸序列为PGTGYFDV；