[发明专利]基于纳米金颗粒（AuNPs）适配体偶联比色和人工智能算法检测母乳中的阿莫西林

权利要求书

1.一种基于纳米金颗粒(AuNPs)适配体显色法联合智能手机检测母乳中残留阿莫西林的方法，包括以下步骤：

(1)纳米金颗粒(AuNPs)的制备称取0.0824g氯金酸粉末，溶解于200ml超纯水中，混合均匀形成1mmol/L氯金酸溶液，称取0.2282g柠檬酸三钠粉末，溶解于20ml超纯水中，混合均匀形成38.8mmol/L柠檬酸三钠溶液。保持氯金酸溶液在剧烈沸腾与均匀搅拌下，将20ml柠檬酸三钠溶液快速加入锥形瓶，反应溶液从淡黄色迅速变为黑色，然后转变为深酒红色。持续搅拌加热至溶液沸腾至少20分钟后，关闭加热电源，再继续搅拌冷却15分钟。样品冷却后，将其转移至干净的深色样品瓶中置于4℃冰箱保存以备后续使用。

(2)适配体制备将装有HPLC纯化的适配体的EP管以4000rpm离心5分钟，在此EP管中加入超纯水配制成100μmol/L的溶液。

(3)纳米金颗粒(AuNPs)与适配体的偶联将上述制备的适配体溶液稀释至100nmol/L，加入与适配体溶液体积比为2:1的AuNPs溶液，振荡混匀15秒，室温孵育15分钟。

(4)药物溶液与AuNPs适配体偶联溶液反应在96孔板中加入100μL AuNPs适配体偶联溶液，再分别加入100μL各浓度阿莫西林溶液，振荡混匀10分钟后，加入盐溶液。

(5)结果检测将96孔板放置于扫描仪上，经扫描后得到颜色变化图片结果，将图片传输到智能手机并分析其RGB值，自动计算出母乳中残留阿莫西林的浓度。

(6)对母乳样本进行检测。

2.根据权利要求1所述的基于纳米金颗粒(AuNPs)适配体显色法联合智能手机检测母乳中残留阿莫西林的方法，其特征在于，纳米金颗粒(AuNPs)直径约为18-25nm，浓度为17nmol/L，纳米金颗粒分散时在520nm左右处有最高吸收峰，聚集时在620nm处有最高吸收峰。

3.根据权利要求1所述的基于纳米金颗粒(AuNPs)适配体显色法联合智能手机检测母乳中残留阿莫西林的方法，其特征在于，适配体序列为5’-TTAGTTGGGGTTCAGTTGG-3’。

4.根据权利要求1所述的基于纳米金颗粒(AuNPs)适配体显色法联合智能手机检测母乳中残留阿莫西林的方法，其特征在于，AuNPs浓度为11.3nmol/L，适配体浓度为33.3nmol/L。

5.根据权利要求1中所述的基于纳米金颗粒(AuNPs)适配体显色法联合智能手机检测母乳中残留阿莫西林的方法，其特征在于，制备方法中所述盐溶液为氯化钠溶液，浓度为500mmol/L。

6.根据权利要求1所述的基于纳米金颗粒(AuNPs)适配体显色法联合智能手机检测母乳中残留阿莫西林的方法，其特征在于检测结果经扫描仪采集图象后传输至智能手机，并由智能手机分析RGB值计算出母乳中残留阿莫西林的浓度。

7.根据权利要求1所述的基于纳米金颗粒(AuNPs)适配体显色法联合智能手机检测母乳中残留阿莫西林的方法，其特征在于对母乳样本检测前需加三氯乙酸对母乳进行前处理以去除蛋白和脂质。