[发明专利]一种信号放大技术在PGP9.5检测试剂盒中的应用

说明书

本发明提供了一种信号放大技术在PGP9.5检测试剂盒中的应用，涉及生物技术领域，该试剂盒包括检测试剂条；其中，检测试剂条包括试剂A、试剂B和试剂C；所述试剂A的原料包括PGP9.5抗体1；所述试剂B的原料包括PGP9.5抗体2；所述试剂C包括抗FITC抗体。本发明在原有发明基础上进行了改进，增加了“FITC‑抗FITC抗体”信号放大体系，增加了试剂盒的灵敏度，降低了主要原料使用量，降低了材料成本。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种信号放大技术在PGP9.5检测试剂盒中的应用。

背景技术

创伤性脑损伤(TBI)是由外力引起的大脑损伤，会破坏大脑正常功能，导致人的认知能力或身体机能受损。在所有类型TBI中，最常见的后遗症为头痛(47.9％)和记忆异常(42％)(《英国神经外科杂志》，2018)，约三成患者需要心理辅导或神经病学治疗。TBI是神经外科中最常见疾病，也是世界范围内主要的死亡原因及致残因素之一，其后遗症对患者健康有永久性影响。

疑似TBI的医疗护理流程分为三步，首先是使用15分格拉斯哥昏迷量表(GCS)(美国外科医师学会创伤委员会，1997)对神经进行评估，以评定脑损伤严重度，然后进行结构性神经影像学检查，最常见的是通过头部CT扫描来可视化骨折和颅内病变。最后根据CT结果制定治疗方案、留院观察或出院。

目前，CT扫描是广泛用于帮助临床医师评估TBI的唯一客观、简单且可靠的选择。然而，CT结果的正确性与CT设备的准确性及医师的阅片水平直接相关，和其他检测方法相比，是一种相对主观的判断方法。约90％轻度TBI(有时被称为“脑震荡”)的CT扫描结果呈阴性(Toth，2015)。这些患者中只有不到1％的人需进行神经外科干预(Papa L，2012)。鉴于这些患者的CT扫描阳性百分比非常低且不必要影像学检测可能会增加辐射诱发癌变的风险，寻找开发其他的脑损伤诊断方法来准确判断颅脑损伤程度和评估预后，具有巨大的临床意义和战略意义。

脑特异性蛋白产物9.5(PGP9.5)是一种去泛素化酶，也是一种神经系统特异性蛋白。人的PGP9.5由223个氨基酸组成，主要分布于成熟神经元，特别是黑质中，在未分化的中枢神经和周围神经均有分布。PGP9.5作为脑中含量最丰富的蛋白质之一，其含量可占脑可溶蛋白的2％。PGP9.5经由泛素相关途径行使对细胞增生、分化和凋亡的调节功能。在TBI中，PGP9.5在1小时内会通过血脑屏障进入血液，导致血清PGP9.5显著升高。对TBI的早期诊断，鉴别诊断和判断预后有重要的意义，临床上主要用于脑外伤的辅助诊断。专利CN201780080585.4公开了一种针对泛素C末端水解酶L1(UCH-L1)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的抗体及相关方法，主要针对已知或疑似患有脑损伤或损害例如轻度创伤性脑损伤等神经损害的个体，提供了相应的方法、系统和试剂盒。但该发明重点保护的是蛋白，相关方法检测时间长、灵敏度低且线性较窄。

针对现有技术中存在的问题，提供一种快速、简便能为创伤性脑损伤提供辅助诊断的体外诊断试剂盒十分必要。

发明内容

本发明针对现有技术存在的问题，为了能够快速、简便地检测人外周血中脑特异性蛋白产物的含量，提供了一种操作简便、能为创伤性脑损伤提供辅助诊断的体外诊断试剂盒及其制备方法和使用。本发明中的试剂盒是一种采用磁微粒化学发光法定量分析人外周血脑特异性蛋白产物的水平，用于创伤性脑损伤等神经系统疾病的辅助诊断。本发明在原有发明基础上进行了改进，增加了“FITC-抗FITC抗体”信号放大体系，增加了试剂盒的灵敏度，降低了主要原料使用量，降低了材料成本。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明提供了一种PGP9.5检测试剂盒，包括检测试剂条；所述检测试剂条包括试剂A、试剂B和试剂C；

所述试剂A的原料包括PGP9.5抗体1；所述试剂B的原料包括PGP9.5抗体2；所述试剂C包括抗FITC抗体；