[发明专利]一种用于单糖分析的高效液相法

说明书

本发明涉及一种用于单糖分析的高效液相法。具体地，本发明提供一种用于测定单糖的HPLC方法。本发明所述的方法能够同时对多种单糖进行定性和定量测定。

技术领域

本发明涉及医药和生物技术领域，具体涉及一种用于单糖分析的高效液相法。

背景技术

糖类物质根据功能基团的不同，可分为醛糖、酮糖、糖醇和糖醛酸四大类；依据糖的还原氧化特性，又可以分成还原性糖和非还原性糖，醛糖属于还原性糖，酮糖属于非还原性糖；根据糖残基数目的多少，糖类物质又可分为单糖、寡糖和多糖。单糖可以依照其碳数的不同分为丙糖、丁糖、戊糖、己糖和庚糖，常见的单糖有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖等。寡糖是由少数(2～6个)单糖缩合形成的聚合物，低聚糖通常是指20个以下的单糖缩合形成的聚合物，而多糖则由多单糖分子缩合、失水而成的。

现有技术中的菲林法、二硝基水杨酸法等化学分析方法以及电泳法、光度法等，由于无法对体系中的各种单糖进行预先分离，所以得到的只是单糖的总和。

由于单糖的极性较强，结构相近，且缺乏光学活性，因此，现有技术的单糖分析方法往往只是对一种单糖进行分析测定，在需要同时分析多种单糖的情况下例如用于糖的结构研究或对医药质控，对各个单糖进行单独分析效率低下，无法满足工业化需求。此外，现有的对多个单糖进行同时分离和测定的方法存在许多缺点，例如单糖无法实现与基线的有效分离，单糖的分离度低，各个单糖的标准曲线较差，检出限和灵敏度低等等，从而难以有效的对多个单糖同时分离和测定，进而限制了对多种单糖的结构研究、定性定量和医药质控等等。

因此，本领域需要开发一种能够同时对多种单糖进行测定的方法。

发明内容

本发明的目在提供一种能够同时对多种单糖进行测定的HPLC方法。

本发明第一方面提供一种用于测定单糖的HPLC方法，所述的方法包括步骤：

(1)通过高效液相对样品中的单糖进行测定；

所述的高效液相的色谱条件为：

色谱柱：反相色谱柱；

流动相：流动相A和流动相B，所述的流动相A包括硼酸盐缓冲液；所述的流动相B包括乙腈；和

流动相洗脱：所述的流动相洗脱为梯度洗脱，所述的梯度洗脱的顺序为：