[发明专利]一种影响山新杨耐盐性的bHLH基因及其应用

说明书

本发明公开了一种影响山新杨耐盐性的bHLH基因及其应用，该bHLH基因的序列如序列表1所示，bHLH基因的氨基酸序列如序列表2所示，其应用是bHLH基因的敲除表达对山新杨的耐盐性有影响，则有助于耐盐杨树新种质的培育，研究成果为杨树耐盐性品种改良提供了优良的抗性基因，具有重要科学意义。

技术领域

本发明属于基因工程的技术领域，具体涉及一种影响山新杨耐盐性的bHLH基因及其应用。

背景技术

转录因子是胁迫反应基因的主要调节因子，是植物改良的优先选择。然而，不同植物的转录因子仍有许多有待发现，在超过80个家族中，仅仅少数几个转录因子深入研究了在生物和非生物胁迫反应中具有的作用。碱性螺旋-环-螺旋蛋白(bHLH)是真核生物中最广泛的一类转录因子，通过识别靶基因中的特定基序并与之相互作用来调节基因表达；不仅普遍参与植物的生长和代谢，而且在植物对逆境的响应中也发挥着重要作用。然而，大多数关于bHLH转录因子的研究大多集中在一小部分模式植物与作物中。尽管已经使用多种分子生物学方法来探索bHLH转录因子在植物生长和发育的各个阶段以及代谢途径和应激反应中的作用，但关于这些蛋白质的功能和调节作用还有很多需要了解。

山新杨(Populus davidiana×Populus bolleana)，属杨柳科杨属植物，是山杨与新疆杨人工杂交选育出的优良无性系。山新杨生长速度快，适应能力强，抗逆性能好，是北方寒冷地区杨树品种中观赏价值非常高的城乡及庭院绿化树种，具有重要的经济价值。近年来，通过基因工程专业技术对林木进行有目的的遗传改良已经显现出良好势头和发展潜能。因此，探索出有关林木植物个体抗逆性能的基因，研究其生理功能调控特性及形态调控反应机制，对促进林木植物分子生物学技术研究、培育新型林木植物品种提供学术理论和实用价值具有重要意义。

盐胁迫是影响植物生长发育的主要环境胁迫，而目前关于山新杨bHLH转录因子家族基因耐盐功能的相关研究还未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种影响山新杨耐盐性的bHLH基因及其应用，为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种影响山新杨耐盐性的bHLH基因，bHLH基因的序列如序列表1所示，bHLH基因的氨基酸序列如序列表2所示。

一种影响山新杨耐盐性的bHLH基因的应用，其应用是bHLH基因的敲除表达影响山新杨的耐盐性。

bHLH基因的敲除表达影响山新杨的耐盐性的检测步骤如下：

1山新杨bHLH转录因子家族基因的生物信息学分析

1.1山新杨与拟南芥bHLH基因的聚类分析

从山新杨基因组数据库中获得113个bHLH基因氨基酸序列，利用MEGA-X软件与9个已知与非生物胁迫相关的拟南芥bHLH基因采用邻接法构建系统进化树并进行分析。

1.2山新杨bHLH1基因与拟南芥bHLH基因多序列比对分析

将筛选出的山新杨bHLH1基因与拟南芥bHLH基因的氨基酸序列进行多序列比对分析。

1.3山新杨bHLH1基因理化性质分析

通过在线网站ProtParam tool(https://web.expasy.org/protparam/)，对山新杨bHLH1基因序列以及氨基酸序列进行分析。

2盐胁迫下bHLH1基因在山新杨不同组织中的表达分析