[发明专利]通过抑制破骨细胞的形成来减少卵巢切除诱导的骨丢失的杨梅素负载的纳米胶束制备方法

说明书

本发明提供了通过抑制破骨细胞的形成来减少卵巢切除诱导的骨丢失的杨梅素负载的纳米胶束制备方法，属于药物制剂领域。旨在提供一种提高载药量的杨梅素负载的纳米胶束,以改善杨梅素的溶解度和口服生物利用度以及通过抑制破骨细胞的形成来减少卵巢切除诱导的骨丢失。其技术方案要点是，所述杨梅素负载的纳米胶束(以下简称杨梅素胶束)的制备方法为：以骨靶向材料AL‑P(LLA‑CL)‑PEG‑P(LLA‑CL)与杨梅素制备成杨梅素骨靶向胶束。制备的杨梅素胶束具有较小的粒径和较高的包封率，增强了其体外溶解度及体内生物利用度，并显著提高了成骨细胞的ALP活性，增强了抗去势大鼠骨质疏松的治疗效果。为杨梅素和其他类似的水不溶性化合物的临床应用提供了初步的信息。

技术领域

本发明属于药物制剂领域,尤其涉及通过抑制破骨细胞的形成来减少卵巢切除诱导的骨丢失的杨梅素负载的纳米胶束制备方法。

背景技术

杨梅素(3，5，7，3′，4′，5′-六羟基黄酮)是一种多羟基黄酮醇类化合物，存在于多种天然植物中，如杨梅树皮和树叶、茶、洋葱中等，在药物的研究与应用中具有资源优势。研究表明，杨梅素具有广泛的药理活性作用，包括降血糖、抗氧化、保肝、抗炎镇痛、抗细菌和抗肿瘤等。也有研究表明杨梅素具有促进成骨活性，抑制破骨活性的作用。目前，杨梅素已被FDA批准作为添加剂应用于医药、食品、保健品中，具有较大的开发和应用前景。

杨梅素呈黄色针状结晶状，易溶于甲醇、乙醇、乙腈等有机溶剂中，不溶于水，且杨梅素结构中含有多个羟基，导致其在空气中极易被氧化和光解，在酸性条件下较为稳定，而在偏中性及碱性环境中稳定性较差，易被破坏。杨梅素不溶于水，导致其在胃肠道吸收较差，生物利用度低。满娜等人通过给大鼠灌胃以300mg/kg的杨梅素混悬液进行药代动力学研究，结果表明其在大鼠体内的最大吸收浓度为0.57g/L，药时曲线下面积为5.83hμg/mL，口服生物利用度很低，这很大程度上限制了杨梅素的开发应用空间，因而寻找一个合适的载体以提高其水溶性及水中的稳定性和生物利用度是十分必要的。目前，关于杨梅素的多种例如微乳、纳米脂质体、胶束及包合物等制剂研究都取得了一定进展。这些制剂可以大幅度提高杨梅素的水溶解度和稳定性，并延长杨梅素在体内的滞留时间进而提高其生物利用度。

聚合物胶束是由两亲性嵌段共聚物在水中自组装成核/壳结构的有序聚集体。嵌段共聚物的疏水端可包裹难溶性药物，而亲水端则增加了体系在水中的溶解度。此外，通过对嵌段共聚物进行修饰，还可以达到靶向给药的目的。聚乙二醇(PEG)是一种水溶性、生物相容性良好且无免疫原性的非离子聚合物,在药物递送系统研究领域被广泛应用。利用PEG上的可修饰基团,将其作为靶向配体分子与药物(或者药物载体)之间的桥连臂,可构建主动靶向药物载体。阿仑膦酸钠(ALN)属于第三代双膦酸盐类药物,具有很强的亲骨性，与羟基磷灰石有极强亲和力，能够沉积于骨骼，抑制破骨细胞活性，促进破骨细胞凋亡，可以有效减少骨吸收和减慢骨丢失的速度，改善了骨代谢，且其结构简单,可化学修饰,被广泛用作递药系统中的骨靶向配体。P(LLA-CL)是聚-L-乳酸(PLLA)和聚ε-己内酯(PCL)的聚合物，因其具有很高的生物相容性，目前常被应用于组织工程和药物递送系统中。

骨质疏松是一种全身代谢性的骨骼疾病，以骨组织单位体积中骨量减少、骨组织显微结构发生退行性改变、骨强度降低、骨骼的脆性增加易发生骨折为特征，严重影响了患者的生活质量，被世界卫生组织列为三大老年病之一。目前，临床上用于治疗骨质疏松的药物主要分为两类，骨吸收促进剂(如雌激素)和骨形成促进剂(如他汀类药物)。但此类药物具有效果不显著，只能适当减缓骨质疏松的症状，且用药剂量大，对其他非靶向器官可能具有一定毒副作用等缺点。因而，寻找一个天然，安全有效且具有较好靶向效果的药物具有重要的意义。有研究证明，黄酮类小分子化合物与雌激素具有类似的化学结构，能有效恢复骨质疏松动物的骨量，比传统的治疗药物更适合长期使用。

发明内容