[发明专利]一种以CdTe量子点为发光标记物定量检测CEA抗原的化学发光免疫分析试剂盒

说明书

本发明涉及一种以CdTe量子点为发光标记物定量检测CEA抗原的化学发光免疫分析试剂盒，该试剂盒包括：生物素标记的CEA单抗一、标准浓度的CEA抗原、链霉亲和素标记的磁珠、CdTe量子点标记的CEA单抗二、激发液。激发液由PBS及KMnO₄组成。激发液中KMnO₄能够氧化CdTe量子点，产生闪光型单色近红外化学发光辐射，发光时间为1秒内，最大发射波长为785纳米。该试剂盒基于CdTe量子点与KMnO₄产生闪光型化学发光的原理实现CEA抗原的检测，检测速度快，发光材料及激发液稳定易储存，化学发光波段单色性较好且位于近红外区。该试剂盒在0.1ng/mL‑100ng/mL的浓度范围内表现出良好的线性关系，检测限为0.05ng/mL，具有良好的临床应用前景。

技术领域

本发明属于免疫检测技术领域，涉及一种以CdTe量子点为发光标记物定量检测CEA抗原的化学发光免疫分析试剂盒。

背景技术

化学发光免疫分析具有灵敏度高、检测速度快、操作简单和自动化程度高等优势，正在逐渐替代传统的酶联免疫检测技术。目前，商业化的化学发光免疫分析全部基于分子化学反应类化学发光体系实施，其发光标记物主要为鲁米诺、吖啶酯、金刚烷化合物分子等，辐射波段位于可见光区。

本发明的发明人前期专利文件CN113702638A公开了一种以CuInS₂@ZnS纳米晶为发光标记物定量检测CEA抗原的化学发光免疫试剂盒。该试剂盒以CuInS₂@ZnS纳米晶作发光物，以水合肼、过氧化氢为双元激发剂实现了CEA抗原检测。CuInS₂@ZnS纳米晶/水合肼-过氧化氢体系可产生近红外化学发光辐射，但单色性较差(半峰宽为158纳米)；双元激发剂中水合肼为强还原性物质，可与过氧化氢发生反应从而导致激发液不易稳定储存。

众所周知，纳米粒子具有优异的光致发光与电致化学发光性能，已在基础研究领域被广泛用于光致发光与电致化学发光生化分析的发光标记物(Chem.Rev.2014,114,11027)。尽管已有报道显示纳米粒子亦可用作化学发光生化分析的标记物，但是纳米粒子在化学发光生化分析研究领域的应用主要以催化剂和增强剂的形式出现。因此，以纳米材料为发光标记物，开发具有性能稳定的、单色近红外化学发光体系对化学发光免疫分析的发展具有重要意义。

发明内容

针对现有技术存在的不足，尤其是以纳米粒子为发光标记物的单色高性能化学发光体系的种类有限，以及现有化学发光试剂盒激发液不容易存储的缺陷。本发明提供一种以CdTe量子点为发光标记物定量检测CEA抗原的近红外化学发光免疫分析试剂盒，该试剂盒采用性能稳定的CdTe量子点作为发光试剂，能够被稳定储存的KMnO₄溶液作为化学发光激发剂，发光波段位于近红外区且具有较好的单色性，弥补了现有技术的不足。

术语解释：

CEA：癌胚抗原，英文名为carcinoembryonic antigen，简称CEA。

EDC：1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，英文名为1-(3-Dimethylaminopropyl)-ethylcarbodiimide hydrochloride，简称EDC。

磺基-NHS：N-羟基硫代琥珀酰亚胺钠盐，英文名为Hydroxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonicacid sodium salt，简称磺基-NHS。

BSA：牛血清白蛋白，英文名为Albumin from bovine serum，简称BSA。

PBS：磷酸缓冲盐溶液的简称，主要成分包括K₂HPO₄、KH₂PO₄。

本发明的技术方案如下：