[发明专利]一种幽门螺杆菌口服疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种幽门螺杆菌口服疫苗的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)对幽门螺杆菌突变菌进行培养，所述突变菌不含外膜孔蛋白的ompF基因和CagA基因，同时改造lipid A结构，敲除相关合成基因lpxE，lpxF和futB；

(2)离心处理后得到沉淀为突变菌外膜囊泡粗提取物；

(3)再依次进行盐析反应和离心处理后得到沉淀为突变菌外膜囊泡精纯物；

(4)以所述突变菌外膜囊泡精纯物、LTA2B免疫佐剂为主要原料制备成壳聚糖-海藻酸钠包裹免疫原微球。

2.根据权利要求1所述的一种幽门螺杆菌口服疫苗的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)采用的培养基为液体布氏肉汤培养基，培养温度为37℃，培养至OD600＝1.5。

3.根据权利要求1所述的一种幽门螺杆菌口服疫苗的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)和(3)离心处理中离心力为12000g，离心时间为30min，离心的温度设置为4℃。

4.根据权利要求1所述的一种幽门螺杆菌口服疫苗的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中盐析反应采用PBS复溶沉淀后加35％m/v的硫酸铵；盐析的温度为25℃，时间为20min。

5.根据权利要求1所述的一种幽门螺杆菌口服疫苗的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中LTA2B免疫佐剂：突变菌外膜囊泡精纯物的质量比为1∶1000。

6.根据权利要求1所述的一种幽门螺杆菌口服疫苗的制备方法，其特征在于：所述疫苗制备为胶囊制剂，具体步骤为：将所述壳聚糖-海藻酸钠包裹免疫原微球经过真空干燥形成冻干粉体，将所述冻干粉体与辅料混合后装入胶囊中得到幽门螺杆疫苗胶囊。

7.如权利要求1至6任一所述方法制备的幽门螺杆菌口服疫苗。