[发明专利]IL-17抗体中半胱氨酸残基的选择性还原

权利要求书

1.一种用于选择性还原由哺乳动物细胞重组产生的IL-17抗体制品中的CysL97的方法，其包括：

c)使该制品与至少一种还原剂在某体系中接触以形成还原混合物；和

d)孵育该还原混合物同时保持该体系中的体积氧传质系数(k_La^*)≤0.37h^-1，所述k_La^*通过将溶解氧曲线匹配至饱和曲线而算得；

其中该IL-17抗体各自包含免疫球蛋白重链可变区(V_H)和免疫球蛋白轻链可变区(V_L)，该V_H包含如SEQ ID NO:8所示V_H的三个互补决定区(CDR)，该V_L包含如SEQ ID NO:10所示V_L的三个CDR；并且其中在步骤a)之前，使用在25℃校准的氧探针测得，该制品中的初始氧饱和百分比至少为约60％。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少一种还原剂选自半胱胺、半胱氨酸及其组合。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少一种还原剂是含硫醇的还原剂，通过硫醇-二硫化物交换测得，其在pH 7.0时的标准氧化还原电势E⁰为约-0.20V至约-0.23V。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述至少一种还原剂是半胱氨酸。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤b)期间该体系中的k_La^*≤约0.37h^-1，其中该还原混合物中的半胱氨酸:IL-17抗体摩尔比在约56:1至约118:1之间，并且其中该还原混合物按照步骤b)孵育至多约240分钟。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤b)期间该体系中的k_La^*≤约0.37h^-1，其中该还原混合物中的半胱氨酸:IL-17抗体摩尔比在约77:1至约118:1之间，并且其中该还原混合物按照步骤b)孵育至多约300分钟。

7.如权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤b)期间该体系中的k_La^*＜约0.37h^-1，并且其中该还原混合物中的半胱氨酸:IL-17抗体摩尔比在约46:1至约118:1之间。

8.如权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤b)期间该体系中的k_La^*＜约0.37h^-1，并且其中该还原混合物中的半胱氨酸:IL-17抗体摩尔比在约54:1至约82:1之间。

9.如权利要求4所述的方法，其特征在于，该还原混合物中的半胱氨酸:IL-17抗体摩尔比为约66:1。

10.如前述任一项权利要求所述的方法，其特征在于，在步骤b)期间该体系中的k_La^*≤约0.27h^-1，优选≤约0.18h^-1。

11.如前述任一项权利要求所述的方法，其特征在于，在步骤a)之前，该制品包含约4mg/ml至约19.4mg/ml、例如约10mg/mg至约19.4mg/ml、例如约10mg/ml至约15.4mg/ml、例如约12mg/ml至约15mg/ml、例如约13.5mg/ml的IL-17抗体。

12.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述还原混合物中的半胱氨酸浓度为约4.0mM至约8.0mM，例如约4.8mM至约8.0mM，例如约5.5mM至约6.7mM，例如约6.0mM。