[发明专利]用于评估非肿瘤细胞代谢活性的方法

权利要求书

1.一种通过检测细胞外酸化率评估生物流体样本中存在的，特别是10^{^4}至10^{^5}个细胞每毫升的样本中存在的血液或血液衍生物中的非肿瘤细胞代谢活性的方法，所述方法包括：

将每个单一非肿瘤细胞封装在体积约为10pL至10nL的所述流体中；

在4℃至37℃的温度下培养所述体积至少1分钟；

检测所述培养体积内pH值和/或至少一种酸分子的浓度，所述浓度与所述细胞的所述细胞外酸化率相关，其中相对于培养前相同体积确定的参考pH值和/或浓度而言，所述pH值的降低和/或所述至少一种酸分子的浓度增加表明所述生物流体样本中存在的所述非肿瘤细胞代谢活性的变化；

其中，所述非肿瘤细胞为白细胞，所述代谢活性的评估用于白细胞的功能分类；

其中，此外所述方法包括通过配置成允许区分不同白细胞群的至少一种标记物来获得细胞类型的信息。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述参考pH值和/或浓度通过测量不含非肿瘤细胞的封装体积的所述流体的pH值和/或浓度来确定。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述检测的pH值和/或浓度用于识别和/或分类所述封装的非肿瘤细胞。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述识别和/或所述分类依据至少一个pH值和/或浓度的阈值或范围进行，所述阈值和所述范围对应于作为参考的特定细胞群或亚群的实验测量的正常细胞外酸化率。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中，所述方法包括分离步骤，所述分离步骤用于从所述生物流体样本中分类包括所述非肿瘤细胞的所述体积。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，获得所述细胞类型信息包括：将所述生物流体样本与一个或多个探针接触，所述探针作为适用于与所述非肿瘤细胞表达的抗原结合以获得细胞类型信息的抗体标记物。

7.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，获得所述细胞类型的信息包括：使用检测的物理量，特别是光学量，诸如不同角度的光散射，电量或比色量，作为标记物。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中，所述pH值通过使用pH指示剂，特别是pH值敏感染料或在pH值变化时改变其吸收/发射光谱的指示剂来检测。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述方法包括：用光激光器照射所述封装的非肿瘤细胞，所述检测的pH值是所述照射的封装非肿瘤细胞的发射信号的函数。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中，检测所述pH值和/或浓度在血细胞仪或流式细胞仪类似结构中进行。

11.根据前述任何一项权利要求所述的方法，其中，所述至少一种酸分子选自乳酸、乳酸离子和质子。

12.根据前述任何一项权利要求所述的方法，其中，所述方法包括：建立关系数据库，在所述关系数据库中，每一行均为通过所述白细胞功能分类识别的细胞，每一列均为选自所述pH值和一个或多个所述标记物的所述细胞的特征；使用人工智能程序，特别是机器学习，以对所述数据库进行统计分析，以便根据所述数据库的元素之间的识别模式或复杂关系来获得患者结果预测。

13.根据权利要求12所述的方法，所述方法包括：在每个封装的细胞通过光学检测阈值时捕获其图像，所述图像用作所述关系数据库中的额外元素，每张图像与所述数据库的行相关联，以便通过人工智能程序进行所述统计分析。

14.根据前述任何一项权利要求所述的方法，所述方法包括：分析在特定药物的影响下确定的代谢图谱变化。