[发明专利]新脂肪酶

权利要求书

1.一种脂肪酶，包含与SEQ ID NO 1有至少90％序列相同性的氨基酸序列，或包含其涵盖位置Q55的功能性片段，

前提是脂肪酶在位置Q55具有在中性pH带碱性侧链的氨基酸的取代。

2.如权利要求所述的脂肪酶，其中这样的取代是由选自赖氨酸(K)、精氨酸(R)和组氨酸(H)的氨基酸取代。

3.如权利要求1和/或2所述的脂肪酶，其具有取代Q55K。

4.如前述权利要求中任一项所述的脂肪酶，其具有至少30,000U/g的脂解活性。

5.如前述权利要求中任一项所述的脂肪酶，与根据SEQ ID NO 1的氨基酸相比，所述脂肪酶包含位置Q55的取代外的至少一种保守氨基酸取代。

6.如前述权利要求中任一项所述的脂肪酶，其特征在于，与具有SEQ ID NO 1氨基酸序列的脂肪酶相比，所述脂肪酶在pH≥5.5的介质中具有增加的脂解活性。

7.如前述权利要求中任一项所述的脂肪酶，其特征在于，与具有SEQ ID NO 1氨基酸序列的脂肪酶相比，所述脂肪酶在总胆汁盐浓度≥2.5mM的介质中具有增加的脂解活性。

8.如前述权利要求中任一项所述的脂肪酶，其特征在于，与具有SEQ ID NO 1氨基酸序列的脂肪酶相比，所述脂肪酶在包含2种或更多不同胆汁酸的混合物的介质中具有增加的脂解活性。

9.一种编码前述权利要求中任一项所述的脂肪酶的核酸。

10.如权利要求1-8中任一项所述的脂肪酶在治疗人或动物对象(生产用于所述治疗的药物)中的应用，所述对象

·诊断为,

·患有或

·有风险发展

脂质消化缺陷、消化障碍或炎性病症，或用于预防这样的病症。

11.如权利要求10所述的应用，在所述应用中所述消化障碍是胰腺外分泌机能不全。

12.一种药物组合物，包含权利要求1-8中任一项所述的脂肪酶以及任选存在的一种或多种药学上可接受的赋形剂。

13.一种组合，包含(i)权利要求1-8中任一项所述的脂肪酶或权利要求12所述的药物组合物和(ii)一种或多种治疗活性化合物。

14.一种治疗或预防脂质消化缺陷、消化障碍或炎性病症的方法，所述方法包括向人或动物对象施用治疗足够剂量的(i)权利要求1-8中任一项所述的脂肪酶,(ii)权利要求12所述的药物组合物或(iii)权利要求13所述的组合。

15.一种治疗性成套试剂盒，所述试剂盒包括：

a)(i)权利要求1-8中任一项所述的脂肪酶,(ii)权利要求12所述的药物组合物或(iii)权利要求13所述的组合，

b)施用所述组合物、组合物或组合的设备，和

c)使用说明书。

16.一种生产权利要求1-8中任一项所述的脂肪酶的方法，所述方法包括以下步骤

a)在来自纤毛虫目的表达宿主中表达脂肪酶，和

b)纯化步骤a)中表达的脂肪酶。

17.如权利要求16所述的方法，所述方法包括在步骤a)前，用编码所述脂肪酶的载体转化纤毛虫的步骤。

18.如权利要求16和/或17中任一项所述的方法，其中所述表达宿主来自四膜虫属。

19.如权利要求16-18中任一项所述的方法，其中所述表达宿主是嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)。