[发明专利]增殖细胞和细胞生产物的生产法、间充质干细胞群和干细胞培养上清及其生产法、治疗剂

权利要求书

1.一种增殖细胞的生产方法，其包含下述步骤：

将以0.002～2000细胞/cm²的细胞密度进行了接种的细胞，在增殖培养液中，在选自具有整合素结合活性的层粘连蛋白片段以及其变体中的培养基质的存在下，通过贴壁培养进行培养，使所述细胞增殖。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，

所述培养在含有所述培养基质的增殖培养液中进行。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，

所述细胞为干细胞。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，

所述细胞为间充质干细胞。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的方法，其中，

所述细胞为来源于脐带的间充质干细胞。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的方法，其中，

所述细胞为冷冻细胞。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的方法，其中，

所述培养进行至所述细胞达到汇合状态。

8.根据权利要求1～7中任一项所述的方法，其中，

所述培养在具有500cm²以上的底面积的培养容器中进行。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的方法，其中，

所述培养基质为具有整合素结合活性的层粘连蛋白片段。

10.根据权利要求1～8中任一项所述的方法，其中，

所述培养基质为具有整合素结合活性的层粘连蛋白片段的变体。

11.一种细胞生产物的生产方法，其包含：

依照权利要求1～10中任一项所述的方法在增殖培养液中培养细胞，以贴壁状态得到增殖细胞的步骤；以及

在使所述增殖细胞保持所述贴壁状态的同时，在生产培养液中进行培养，使所述细胞生产细胞生产物的步骤。

12.一种细胞生产物的生产方法，其包含：

依照权利要求1～10中任一项所述的方法在增殖培养液中培养细胞，以贴壁状态得到增殖细胞的步骤；

在使所述增殖细胞保持所述贴壁状态的同时，在生产培养液中进行培养，使所述细胞生产细胞生产物的步骤；以及

在所述生产培养液中的所述培养之后，在使所述增殖细胞保持所述贴壁状态的同时，在恢复培养液中进行培养的步骤，

所述生产培养液中的所述培养与所述恢复培养液中的所述培养在保持细胞的所述贴壁状态的同时交替重复进行。

13.根据权利要求11或12所述的方法，其中，

所述生产培养液为不包含来源于异种的成分的培养液。

14.根据权利要求11～13中任一项所述的方法，其中，

所述生产培养液为不包含细胞因子、胰岛素的培养液。

15.根据权利要求11～14中任一项所述的方法，其中，

所述生产培养液为不包含蛋白质的培养液。

16.根据权利要求11～15中任一项所述的方法，其在所述生产培养液中的所述培养之后，进一步包含回收所述生产培养液的上清的步骤。