[发明专利]用于在细胞分选中标识饱和数据信号的方法及用于其的系统

说明书

本公开的方面包括用于响应于基于检测的来自液流中的粒子的光的一个或多个饱和数据信号而调整粒子分类索引的方法。根据某些实施例的方法包括：检测来自液流中的粒子的光；基于检测的光生成多个数据信号；标识一个或多个饱和数据信号；生成与标识的饱和数据信号相对应的饱和信号索引；以及针对粒子分类索引应用饱和信号索引，以生成调整的粒子分类索引。在一些实施例中，方法包括：通过计算排除了一个或多个饱和数据信号的用于粒子的荧光的调整的光谱解混矩阵，确定(例如，用于粒子分选决策的)粒子的一个或多个参数。还提供了用于实施主题方法的系统及集成电路器件(例如，现场可编程门阵列)。还描述了非暂时性计算机可读存储介质。

相关申请的交叉引用

根据35U.S.C.§119(e)，本申请要求于2020年2月27日提交的美国临时专利申请序列号62/982,604的申请日的优先权，该申请的公开内容通过引用并入本文。

背景技术

诸如分选流式细胞仪的流式粒子分选系统被用于基于粒子的至少一个测量的特性来分选流体样本中的粒子。在流式粒子分选系统中，流体悬浮液中的诸如分子、分析物结合珠或各个细胞的粒子在流中经过检测区，在该检测区中，传感器检测流中包含的要被分选的类型的粒子。传感器在检测到要被分选的类型的粒子时，触发选择性地分离感兴趣的粒子的分选机构。

通常通过使流体流经过检测区而执行粒子感测，在该检测区中，粒子暴露给来自一个或多个激光器的照射光，并且测量粒子的光散射和荧光性质。粒子或其成分可以利用荧光染料进行标记，以促进检测，并且可以通过将在频谱上有差别的荧光染料用于标记不同的粒子或成分而同时检测多种不同的粒子或成分。使用一个或多个光电传感器执行检测，以促进每一个不同的荧光染料的荧光的独立测量。

为了分选样本中的粒子，点滴(drop)充电机构在液流的断开点处利用电荷对液流中的包含要分选的粒子类型的液滴进行充电。液滴经过静电场并且基于液滴上的电荷的极性和数量偏转至一个或多个采集容器中。静电场不使不带电的液滴偏转。

发明内容

本公开的方面包括用于响应于基于检测的来自液流中的粒子的光的一个或多个饱和数据信号而调整粒子分类索引的方法。根据某些实施例的方法包括：检测来自液流中的粒子的光；基于检测的光生成多个数据信号；标识一个或多个饱和数据信号；生成与标识的饱和数据信号相对应的饱和信号索引；以及针对粒子分类索引应用饱和信号索引，以生成调整的粒子分类索引。在一些实施例中，方法包括：通过计算排除一个或多个饱和数据信号的用于粒子的荧光的调整的光谱解混矩阵，确定(例如，用于粒子分选决策的)粒子的一个或多个参数。还提供了用于实施主题方法的系统及集成电路器件(例如，现场可编程门阵列)。还描述了非暂时性计算机可读存储介质。

在一些实施例中，饱和信号索引是标识饱和的一个或多个检测器通道的二进制字。例如，饱和信号索引可以是由8个或更多个比特组成的二进制字，例如16比特二进制字、例如32比特二进制字、例如64比特二进制字、例如128比特二进制字、以及包括256比特二进制字。在实施例中，液流中的粒子的一个或多个参数基于生成的数据信号来确定。在一些实例中，确定粒子的一个或多个参数包括：计算用于粒子的荧光的光谱解混矩阵。在某些实例中，感兴趣的样本包括多个萤光团，其中每个萤光团的荧光谱与样本中的至少一个其他萤光团的荧光谱重叠。例如，每个萤光团的荧光谱可以与样本中的至少一个其他萤光团的荧光谱重叠10nm或更多(例如25nm或更多以及包括50nm或更多)。在一些实例中，样本中的一个或多个萤光团的荧光谱与样本中的两个不同的萤光团的荧光谱重叠例如10nm或更多、例如25nm或更多、以及包括50nm或更多。在其他实施例中，感兴趣的样本包括具有非重叠的荧光谱的多个萤光团。在这些实施例中，每个萤光团的荧光谱在10nm之内或更近(例如在9nm之内或更近、例如在8nm之内或更近、例如在7nm之内或更近、例如在6nm之内或更近、例如在5nm之内或更近、例如在4nm之内或更近、例如在3nm之内或更近、例如在2nm之内或更近以及包括在1nm之内或更近)地临近至少一个其他萤光团。