[实用新型]一种细胞上清外泌体的纯化装置

说明书

本实用新型提供了一种细胞上清外泌体的纯化装置，包括离子交换层析柱和分子筛层析柱，所述离子交换层析柱的上端开设有上样口用以向里倾倒细胞上清，所述离子交换层析柱的底部连接有第一套管用以将细胞上清引入三通阀的上进口进行分流，所述三通阀的下出口连接有第二套管，所述第二套管连接有所述分子筛层析柱。本实用新型的优势在于操作简便，省时省力，设备的成本低，可以满足大多数小型实验室的需求。

技术领域

本实用新型属于生物技术领域，具体而言，涉及一种细胞上清外泌体的纯化装置。

背景技术

外泌体(exosome)是由多种活细胞分泌的囊泡小体，其中含有蛋白质和RNA等多种组分，直径大多介于30～100nm之间。在电子显微镜下，可见外泌体由双层磷脂分子包裹，形态呈扁形或球形小体，有些为杯状；其在体液中的存在形式以球形结构为主，通常可在蔗糖密度梯度溶液中密度1.13～1.19g/ml的范围获得富集。目前认为外泌体可由各种类型的细胞分泌，发源于细胞内吞系统中的晚期内体。

外泌体在外周血、尿液、唾液、腹水、羊水等体液中具有很高的丰度，而不同组织来源的外泌体在组成和功能方面存在差异，同时这种差异受到细胞外基质和微环境的动态调控。肿瘤来源或肿瘤相关的外泌体是调控肿瘤发生发展的重要机制，对肿瘤外泌体的分析和检测可以辅助肿瘤的早期诊断、疗效评价和预后分析。此外，外泌体及其修饰加工产物还可以作为基因或药物的有效载体，用于肿瘤治疗。

最常用的外泌体纯化手段是超离法，采用低速离心、高速离心交替进行，可分离到大小相近的囊泡颗粒。超离法因操作简单，获得的囊泡数量较多而广受欢迎，但过程比较费时(20小时以上)，且回收率不稳定，纯度也受到质疑；此外，重复离心操作还有可能对囊泡造成损害，从而降低其质量。

有鉴于此，特提出本实用新型。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种细胞上清外泌体的纯化装置，可以快速高效的收集纯化外泌体，操作简便，结构简单，耗时短。

为了实现上述技术目的，本实用新型提供了以下技术方案：

本实用新型提供了一种细胞上清外泌体的纯化装置，包括离子交换层析柱和分子筛层析柱，所述离子交换层析柱的上端开设有上样口用以向里倾倒细胞上清，所述离子交换层析柱的底部连接有第一套管用以将细胞上清引入三通阀的上进口进行分流，所述三通阀的下出口连接有第二套管，所述第二套管连接有所述分子筛层析柱。

现有技术中，外泌体纯化手段是超离法比较费时，且回收率不稳定，纯度也受到质疑；此外，重复离心操作还有可能对囊泡造成损害，从而降低其质量。

本实用新型的一种细胞上清外泌体的纯化装置，通过设置了离子交换层析柱先将外泌体富集在阴离子交换树脂上，将废液排出后在通过外泌体洗脱液将外泌体从离子交换树脂上洗脱下来送入分子筛层析柱，分子筛层析柱将外泌体与杂蛋白、无机盐进行分离，最终剩下的就是纯化的外泌体了。这样的方法操作简便，省时省力，关键是设备的成本低，可以满足大多数小型实验室的需求。

优选的，所述分子筛层析柱的下端设置有收集口，所述收集口为漏斗形。这样的漏斗形可以将纯化的外泌体收集至外泌体收集瓶中，可以减缓纯化外泌体的流速。

优选的，所述收集口的下方放置有外泌体收集瓶用以对纯化外泌体进行收集。

优选的，所述三通阀的侧出口连接有废液导管用以将所述离子交换层析柱中的废液导流至废液收集瓶。细胞废液属于生物污染物，不能直接排放，所以应当通过废液收集瓶将废液收集后统一处理。

优选的，所述上样口为倒锥形，上边的开口大，与所述离子交换层析柱连接的开口小。上样口之所以为倒锥形，因为这样子比较美观、轻便，方便使用者将上清液倒入。

优选的，所述离子交换层析柱内填充有阴离子交换树脂用以富集外泌体。