[发明专利]一种阿德福韦酯片致突变杂质的检测方法

说明书

本发明公开了一种阿德福韦酯片致突变杂质的检测方法。该检测方法为：精密量取对照品溶液与供试品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算氯化苄的含量。本发明将阿德福韦酯片致突变杂质分离出来，从而实现阿德福韦酯片中其他杂质与致突变杂质的分离与测定，实现对制剂的质量控制。本发明采用操作简单的梯度洗脱方式，运行时间较短，灵敏度高，分离度和重现性好。

技术领域

本发明属于医药质量检测技术领域，具体涉及一种阿德福韦酯片致突变杂质的检测方法。

背景技术

阿德福韦酯片为白色或类白色片，适用于治疗有乙型肝炎病毒活动复制证据，并伴有血清氨基酸转移酶(ALT或AST)持续升高或肝脏组织学活动性病变的肝功能代偿的成年慢性乙型肝炎患者。羟甲基杂质结构中具有N-羟甲基类警示结构的致突变杂质，主要由阿德福韦单酯的降解产生。阿德福韦单酯为阿德福韦酯的主要降解杂质，阿德福韦单酯与其降解产物甲醛发生反应产生羟甲基杂质。生成过程如下：

发明内容

本发明的目的在于提供一种阿德福韦酯片致突变杂质的检测方法。

所述的阿德福韦酯片致突变杂质的检测方法为：精密量取对照品溶液与供试品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算氯化苄的含量；色谱条件为：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.02-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相A，以乙腈为流动相B；检测波长为210-280nm；流速为每分钟0.8-1.1mL；柱温为25-40℃；进样体积5-20μl，洗脱梯度为：

所述供试品溶液的配制方法为：将待测药品研磨成细粉精密称定后置于50ml量瓶中，加溶剂40ml，冰浴超声15分钟使阿德福韦酯溶解，放置至室温，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液；所述的溶剂为体积比为82:18的磷酸二氢钾溶液和乙腈混合液，所述磷酸二氢钾溶液的浓度为0.025mol/L。

所述对照品溶液的配制方法为：取羟甲基杂质对照品精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中含羟甲基杂质2μg的溶液；所述的溶剂为体积比为82:18的磷酸二氢钾溶液和乙腈混合液，所述磷酸二氢钾溶液的浓度为0.025mol/L。

本发明将阿德福韦酯片致突变杂质分离出来，从而实现阿德福韦酯片中其他杂质与致突变杂质的分离与测定，实现对制剂的质量控制。本发明采用操作简单的梯度洗脱方式，运行时间较短，灵敏度高，分离度和重现性好。

附图说明

图1为具体实施方式得到的检测特征图谱。

具体实施方式

配制检测中用到的各溶液：

溶剂：0.025mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈(82:18)；

供试品溶液：取本品细粉适量(约相当于阿德福韦酯50mg)，精密称定，置50ml量瓶中，加溶剂约40ml，冰浴超声15分钟使阿德福韦酯溶解，放置至室温，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液。

对照品溶液：取羟甲基杂质对照品适量，精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中含羟甲基杂质2μg的溶液。

系统适用性溶液：分别取阿德福韦单酯、羟甲基杂质对照品适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中分别约含阿德福韦单酯25μg与羟甲基杂质2μg的溶液，必要时置冰浴中超声使溶解。

灵敏度溶液：取阿德福韦酯对照品适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中约含0.1μg的溶液。

空白辅料：精密称取空白辅料700mg，置50ml量瓶中，加稀释剂约40ml，冰浴超声15分钟，放置至室温，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。