[发明专利]一种调控CD276基因表达的方法

说明书

本申请涉及一种调控CD276基因表达的方法，其包括采用一种特异性调控CD276表达的物质。本申请还分析了其中的调控机制，并最终确定了一个新的药物靶点。本申请的方法能有效抑制细胞增殖、侵袭和转移，同时能依据该物质或调控机制筛选出对靶向CD276的药物或治疗敏感的病人，以便进行精准治疗，因此，具有良好的临床应用前景。

技术领域

本申请涉及一种调控CD276基因表达的方法，属于生物技术领域。

背景技术

癌症是恶性肿瘤的统称，其特点为不正常细胞失控分裂、无限增殖、侵入并破坏周围正常组织。癌症是全球第二大死因，每年导致约1千万人死亡，全球大约六分之一的死亡由癌症造成。目前，化疗仍是癌症治疗主要手段，但远未达到理想的效果。近年来，随着靶向治疗或精准治疗被证实能够极大改善癌症患者的治疗效果，靶向治疗或精准治疗日益成为抗肿瘤治疗领域的热点。然而，靶向治疗或精准治疗的发展依然受到多方面条件的限制，很大程度上归结于没有找到合适的靶点，以及缺乏准确地对各类病人进行分型的方法。

在癌症的免疫治疗方法中，采用检查点的抑制剂治疗是目前最常用的免疫治疗方案。B7-H3(CD276)是B7和CD28家族重要的免疫检查点成员,在多种恶性肿瘤中均有表达，并且与恶性肿瘤的生长、转移、复发、预后不良等因素密切相关，因此，亟需筛选出一种特异性针对CD276的调控物质，并厘清其中的调控机制，从而开发新的药物靶点，以达到有效抑制细胞增殖、侵袭和转移的效果，同时能依据该调控物质或调控机制筛选出对靶向CD276的药物或治疗敏感的病人，以便进行精准治疗。

发明内容

鉴于上述技术问题，本申请一种调控CD276基因表达的方法。

发明人首次发现FKHD家族蛋白与CD276之间存在紧密的关联性。FKHD家族蛋白能特异性地调控CD276的表达，而该调控的靶点序列为CD276基因增强子中的FKHD基序。本申请将通过具体的FKHD家族蛋白FOXA1在某细胞(前列腺癌细胞)中的实验来示例性阐述本申请的核心技术思想。

第一方面，本申请提供了一种调控细胞中CD276基因表达的方法，包括改变FKHD家族蛋白在所述细胞中的表达量或活性的步骤；或者包括在所述细胞中，干预FKHD家族蛋白与CD276基因的增强子相结合的步骤；或者包括在所述细胞中，编辑CD276基因的增强子中的FKHD基序的步骤。

所属领域技术人员知道，蛋白功能的发挥通常与蛋白的表达量和活性有关，因此，FKHD家族蛋白特异性地调控CD276的表达时，改变FKHD家族蛋白的表达量或活性都能影响其对CD276的调控作用。

在一些实施方式中，“调控”为抑制或增强。

在一些实施方式中，“改变”为增加或减少；其可以通过本领域的常规技术手段来实现，包括但不限于加入能增加FKHD家族蛋白表达量或活性的促进剂或激动剂，或者加入能减少FKHD家族蛋白表达量或活性的抑制剂或阻遏剂，或者编辑FKHD家族蛋白的核酸序列，或者使FKHD家族蛋白在细胞中重组表达等；这些物质例如EZH2或其抑制剂GSK126、EPZ-6438、BET或其抑制剂JQ1、LSD1或其抑制剂GSK2879552。

在一些实施方式中，“干预”为促进或阻碍；其可以通过本领域的常规技术手段来实现，包括但不限于加入FKHD家族蛋白的竞争性配体，从而阻碍FKHD家族蛋白与CD276基因的增强子结合；或者编辑CD276基因的增强子序列，以促进或阻碍FKHD家族蛋白与CD276基因的增强子结合等。

在一些实施方式中，“编辑”为突变、修饰或敲除；其可以通过本领域的常规技术手段来实现，包括但不限于点突变、移码突变、重排、甲基化修饰、化学修饰、基因打靶、基因编辑、基因沉默(例如采用siRNA、shRNA质粒和shRNA慢病毒颗粒)等。

在一些实施方式中，FKHD基序的序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示，或者CD276基因的增强子的序列如SEQ ID NO.3所示。