[发明专利]一种抑郁症肝郁化火证疾病小鼠的造模及评价方法

说明书

本发明公开了一种抑郁症肝郁化火证疾病小鼠的造模方法，涉及动物模型构建方法领域，建模方法包括：对健康小鼠施行2‑30天连续睡眠剥夺刺激，并同时每日给予灯光照射日刺激及隔天给粮的刺激，取得的模型小鼠具备抑郁症的症状学表现，同时通过中医证候诊断方法判断该模型具备肝郁化火证的特点。本发明所建立的抑郁小鼠模型不仅一般体征上出现临床上的肝郁化火、抑郁状态，并且通过体重，旷场活动总路程、进入旷场中心的时间、次数和平均速度以及高架十字迷宫中进入开放臂的次数和时间，饮水量、强迫游泳不动时间，以及5‑HT、GABA、DA、ACH指数的全面评价，此模型符合中医肝郁化火的特点，可作为抑郁症肝郁化火证的病机、治疗的进一步研究。

技术领域

本发明涉及动物模型构建技术领域，具体讲是一种抑郁症肝郁化火证疾病小鼠的造模方法。

背景技术

抑郁症是一种严重的精神疾病，主要表现为情绪低落、兴趣减退、思维迟缓等心理异常，世界卫生组织预计，至2030年，抑郁症将上升至全球疾病负担首位。

目前，仅20-30％抑郁症患者对药物治疗有效，而部分患者还会因无法忍受的不良反应而终止服药。所以探索有效且安全的抗抑郁药物迫在眉睫。抑郁症的发病机制较为复杂，其具体机制尚不完全清楚。虽然通过使用人类受试者的死后大脑样本已经克服了一些局限性，但是这些样本经常受到年龄﹑性别、用药史、死后组织收集等因素的影响。因此，合理的抑郁症动物模型对于研究抑郁症发病机制、药物筛选以及指导临床合理用药十分重要。

迄今为止，用于筛选和探寻抗抑郁药物的动物模型极度缺乏，主要造模方式为：慢性不可预知温和刺激(CUMS)造模，但其周期长，技术要求高，所需设备复杂；药物造模动物死亡率高且存在一定不良反应；手术造模制备过程复杂；遗传造模价格昂贵且实际应用受限。

传统医学“辩证论治”的原则强调疾病的个体差异。肝郁化火是抑郁症中医证型其中之一，肝在五行中属木，人体肝脏犹如春升之气，具有条顺、畅达、疏通的特性。如肝气郁结，不疏泄，根据五行理论，木生火，就叫肝郁化火。常可引起不思饮食，小便黄赤，大便秘结，舌质红，弦数等的现象，这与我们模型的外在症状相符合。

中医治疗抑郁的方法独特，而目前鲜有对抑郁症“病证”结合的疾病模型的研究。迄今为止，有关抑郁症不同中医证型的动物模型主要有在西医疾病模型基础上建立中医“证”的动物模型，在疾病的基础上，人为施加干预可能使原有的西医疾病动物模型发生改变，其结果很难达到“病”与“证”都符合动物模型的要求；很多中医“证”的动物模型是由西药产生的不良反应所致。

良好信、效度的疾病动物模型是研究结果能够从实验室顺利向临床转变的重要保证。西医研究中根据病因、病理来构造抑郁症的动物模型，其信、效度均较高，但却忽略了动物的个体差异，在造模过程中强调“病”的模型的构造，弱化了“证”型的构造，病证结合动物模型是现阶段比较理想的动物模型。

发明内容

本发明的目的在于至少解决现有技术中存在的技术问题之一，提供一种抑郁症肝郁化火证疾病小鼠的造模方法。

本发明的技术解决方案如下：

一种抑郁症肝郁化火证疾病小鼠的造模方法，选取健康小鼠，对健康小鼠施行2-30天连续睡眠剥夺刺激，并同时给予灯光照射1-24h/天的刺激以及隔天给粮的刺激。

进一步地，所述睡眠剥夺刺激在设置为间歇性转动的睡眠剥夺仪中进行。

进一步地，所述睡眠剥夺仪的转速为2-50转/min，转动时间为3-24小时/天，间歇性转动的间隔时间为1-10min/次。

本发明还公开了一种如上任意一项所述造模方法得到的小鼠模型的评价方法，包括以下步骤：

步骤一：构建抑郁症模型，并根据旷场实验﹑高架十字迷宫实验、悬尾实验和强迫游泳实验判断抑郁动物是否造模成功；