[发明专利]一种中药膏方的指纹图谱检测方法

权利要求书

1.一种中药膏方的指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、中药膏方供试品溶液的制备：

取不同批次的中药膏方，分别精密称取，置量瓶中，加甲醇，超声提取，定容，过微孔滤膜，得供试品溶液；

步骤2、混合对照品溶液的制备：

精密称定甘草苷、甘草酸铵对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液；

步骤3、原料药材供试品溶液的制备：

取中药膏方原料药材淮小麦、大枣、茯苓、桂圆肉、阿胶粉末各2g，炙甘草、肉桂粉末各0.5g，分别精密称取，置量瓶中，加甲醇，超声提取，定容，过微孔滤膜，得各原料药材供试品溶液；

步骤4，分别精密吸取步骤1的中药膏方供试品溶液、步骤3原料药材供试品溶液和步骤2混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；

步骤5，将步骤4中获得的中药膏方供试品溶液的指纹图谱导出，确定共有峰；记录各共有峰的保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分；

所述的步骤4中，液相色谱条件为：色谱柱：YMC-Pack ODS-A，流动相：

乙腈和0.1％磷酸水，紫外检测器，检测波长：254nm，柱温35℃，流速

1.0mL/min，进样体积：10μL，梯度洗脱程序如下表：

；

所述的中药膏方是通过以下方法制备得到的：取炙甘草30g、淮小麦180g、大枣150g、茯苓120g、桂圆肉75g、肉桂15g，加10倍量的水，先浸泡2小时，然后煎煮3次，合并三次煎煮液，浓缩，加入阿胶黄酒溶液进一步浓缩到密度60℃为1.15-1.20之间，灌装，既得；所述的阿胶黄酒溶液是由阿胶75g，加黄酒150ml炖化得到。

2.根据权利要求1所述的中药膏方的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤1中药膏方供试品溶液制备方法为：取不同批次的中药膏方，精密称定4g，置25mL量瓶中，加甲醇，超声提取30min，定容至25mL，过0.45μm微孔滤膜，得供试品溶液。

3.根据权利要求1所述的中药膏方的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤2混合对照品溶液的制备：取精甘草苷、甘草酸铵对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成浓度分别为57.49μg/mL的甘草苷、80.64μg/mL的甘草酸铵的混合对照品溶液。

4.根据权利要求1所述的中药膏方的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤3原料药材供试品溶液的制备：取中药膏方原料药材淮小麦、大枣、茯苓、桂圆肉、阿胶粉末各2g，炙甘草、肉桂粉末各0.5g，置25mL量瓶中，加甲醇，超声提取30min，定容至25mL，过0.45μm微孔滤膜，得原料药材供试品溶液。

5.根据权利要求1所述的中药膏方的指纹图谱检测方法，其特征在于，指纹谱图中共有峰16个，其中8号峰为甘草苷，15号峰为甘草酸铵；其中炙甘草含有峰为8、9、10、12、13、14、15、16号峰；淮小麦包含有1、2、3、7号峰；肉桂含2、3、11号峰；阿胶含有6号峰；大枣含有4、5号峰；茯苓含有1、2号峰；桂圆肉含有1、2、4、7号峰。