[发明专利]一种动物细胞培养方法在审
| 申请号: | 202111637021.0 | 申请日: | 2021-12-29 |
| 公开(公告)号: | CN114276979A | 公开(公告)日: | 2022-04-05 |
| 发明(设计)人: | 陈光南 | 申请(专利权)人: | 上海日泰医药设备工程有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12M3/00;C12M1/02;C12M1/04;C12M1/10 |
| 代理公司: | 上海兆丰知识产权代理事务所(有限合伙) 31241 | 代理人: | 张磊 |
| 地址: | 201712*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 动物 细胞培养 方法 | ||
本发明公开了一种动物细胞培养方法,包括:步骤S01:将放置有具有多个折叠面的折叠式载体的载体柱放入反应腔的第一腔室并固定;步骤S02:向第一腔室中添加培养液至淹没导流容器和载体柱;步骤S03:接种细胞;步骤S04:开始细胞培养,启动设于第二腔室中的施压机构,将由导流容器上端向下进入第二腔室中的培养液压送至载体柱中,使培养液在压力作用下透过载体后,再由载体柱中流出至第一腔室中,最终再次经导流容器流入第二腔室并被压送至载体柱中形成循环;步骤S05:培养结束后,打开反应腔,将载体柱连同载体从第一腔室中整体取出。本发明能够显著提高细胞培养增殖倍数,防止培养过程中造成细胞死亡,可实现大规模培养各种动物细胞。
技术领域
本发明涉及生物制药技术领域,特别是涉及一种动物细胞培养方法。
背景技术
生物反应器是医药工业里面的重要设备,其作用是对进行医药实验的细胞进行培养。
目前,常用的生物反应器包括流化床反应器和固定床反应器。然而,目前的生物反应器,无论是流化床反应器还是固定床反应器,都存在以下问题:
首先,需要向生物反应器中填装颗粒状的细胞培养载体,不仅费时费力,而且操作困难。并且,受到细胞新陈代谢,以及细胞培养液分布的影响,采用颗粒状的载体方式进行细胞培养,对生物反应器容量进行放大存在很大困难。
同时,颗粒状的细胞培养载体在细胞培养完成后,必须依靠人力并采用网兜等工具捞出,重复处理困难,极大影响了生物反应器的使用效率。
特别是针对流化床反应器,在细胞培养液抽提时,会把细胞培养载体也一并提取,造成操作上的更大困难。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术的不足,提供一种动物细胞培养方法。
本发明实现上述目的的一种技术方案是:
一种动物细胞培养方法,包括以下步骤:
步骤S01:提供一具有第一腔室和第二腔室的反应腔,将放置有具有多个折叠面的折叠式载体的载体柱放入所述第一腔室并固定;
步骤S02:向所述第一腔室中添加培养液至淹没导流容器和所述载体柱;
步骤S03:执行接种细胞;
步骤S04:开始细胞培养,启动设于所述第二腔室中的施压机构,将由所述导流容器上端向下进入所述第二腔室中的培养液压送至所述载体柱中,使所述培养液在压力作用下透过所述载体后,再由所述载体柱中流出至所述第一腔室中,最终再次经所述导流容器流入所述第二腔室并被压送至所述载体柱中形成循环;
步骤S05:培养结束后,打开所述反应腔,将所述载体柱连同所述载体从所述第一腔室中整体取出。
进一步地,步骤S01中,设置使所述载体柱包括相互套合的第一筒体和第二筒体,将所述第一筒体的上端封闭,使所述第一筒体的下端固定在所述第一腔室的底面上并连通所述第二腔室,并在所述第一筒体和所述第二筒体之间形成封闭的空腔,同时,在所述第一筒体的侧壁上设置第一窗口,在所述第二筒体的侧壁上设置第二窗口,使所述第一窗口和所述第二窗口分别连通所述空腔,并将所述具有多个折叠面的折叠式载体放置于所述空腔中;步骤S04中,通过启动所述施压机构,将由所述第一腔室经所述导流容器上端向下流入所述第二腔室中的培养液压送至所述第一筒体中,使所述培养液在压力作用下通过所述第一窗口单向流动并充填至所述空腔中,然后再在压力作用下透过所述载体继续通过所述第二窗口进一步单向流动充填至所述第一腔室中,最终再次经所述导流容器流入所述第二腔室并被压送至所述第一筒体中形成循环。
进一步地,步骤S01中,将一至多个所述载体柱放入所述第一腔室并固定,且当放入多个所述载体柱时,将各所述载体柱围绕在所述导流容器周围并固定。
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