[发明专利]一种甜瓜属野生种与栽培种部分种间杂种的创制方法

说明书

本发明公开了一种甜瓜属野生种与栽培种部分种间杂种的创制方法，以野生种西印度瓜为母本，栽培种‘新红瑞’为父本，进行人工杂交，包括：步骤1、取母本雌花与父本雄花进行授粉，授粉后喷施氯吡脲水溶液和噻苯隆溶液并套袋隔离；步骤2、取授粉后14～21d的幼嫩果实，先清洗表面，然后对果皮表面消毒，取出幼胚；步骤3、将幼胚置于培养基中进行黑暗培养，所述培养基为：MS+6‑BA+蔗糖+植物凝胶混合培养基；步骤4、所述黑暗培养的28～32d后转入继代培养基中继代培养，所述继代培养基为MS培养基，直接诱导幼胚分化成苗。本发明制得了甜瓜属野生种与栽培种部分种间杂种，解决了栽培甜瓜资源遗传基础狭窄，抗病抗逆能力弱的问题。

技术领域

本发明涉及一种甜瓜部分种间杂种的创制方法，特别是一种甜瓜属野生种与栽培种部分种间杂种的创制方法。

背景技术

现有甜瓜育种中，由于大多数甜瓜栽培种在驯化过程中抗病虫害和抗非生物胁迫性差，严重限制了其产量和品质的提高及应用地域范围的拓展，造成甜瓜种质资源品种比较单一、品种间遗传差异较小，遗传基础越来越狭窄。

野生种是作物改良的种质资源，通过远缘杂交可以将野生种中优异的基因转移到栽培种，以增强栽培种的抗病抗逆性，提高果实的品质和产量。但是受到杂交障碍等因素的严重制约，甜瓜属野生种与栽培甜瓜之间的种间杂交很难实现。而存在于甜瓜属栽培植物与野生植物之间杂交不亲和性的机理还不很清楚。西印度瓜作为甜瓜属一个野生种，国内外已经有众多研究者开展了其与同属植物之间的种间杂交研究。20世纪70年代以来，国外学者就西印度瓜野生种开展了相关种间杂交研究(George Fassuliotis and B.V.Nelson，1988；Yuichi Matsumoto，et al,2012)，并取得了不同程度的研究进展，有研究中只收到了西印度瓜与甜瓜杂交的果实，未有成熟的种子；George Fassuliotis and B.V.Nelson通过胚培养和体细胞杂交获得了Cucumis metuliferus×C.anguria的种间杂交F₁。国内王吉明等人2004年的研究中，在西印度瓜×甜瓜授粉3d后的幼胚DNA中扩增出父本的特征带，表明西印度瓜与甜瓜产生了真实的杂交；2010年的研究获得了未见父本特征形态的可育植株。截止目前，试图进行西印度瓜和甜瓜之间的种间杂交都没有成功，未能实现两个物种之间的基因交流。

发明内容

针对上述现有技术缺陷，本发明的任务在于提供一种甜瓜属野生种与栽培种部分种间杂种的创制方法，解决栽培甜瓜资源遗传基础狭窄，抗病抗逆能力弱的问题。

本发明技术方案如下：一种甜瓜属野生种与栽培种部分种间杂种的创制方法，以野生种西印度瓜为母本，栽培种‘新红瑞’为父本，进行人工杂交，包括以下步骤：

步骤1、取母本雌花与父本雄花进行授粉，授粉后喷施氯吡脲水溶液和噻苯隆溶液并套袋隔离；

步骤2、取授粉后14～21d的幼嫩果实，先清洗表面，然后对果皮表面消毒，取出幼胚；

步骤3、将幼胚置于培养基中进行黑暗培养，所述培养基为：MS+6-BA+蔗糖+植物凝胶混合培养基；

步骤4、所述黑暗培养的28～32d后转入继代培养基中继代培养，所述继代培养基为MS培养基，直接诱导幼胚分化成苗。

进一步地，包括步骤5、幼苗驯化移栽，所述幼苗驯化移栽时置于温度为26～28℃，光照强度为1400～1600lx，湿度为61％～81％RH的光照培养箱中进行。

进一步地，所述氯吡脲水溶液浓度为0.001％～0.002％。

进一步地，所述噻苯隆溶液浓度为0.01～0.02mg/L。

进一步地，所述步骤4中的继代培养的培养温度26～28℃，在光周期15～18h/6～9h。

进一步地，所述步骤1中，在授粉前一日，对母本雌花去雄后套袋隔离。