[发明专利]一种快速、简易、低成本筛查尿路感染病原菌的试剂盒及其应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体是一种快速、简易、低成本筛查尿路感染病原菌的试剂盒及其应用，所述试剂盒包含序列SEQ ID NO:1‑12所示的引物，并记载有适当的PCR反应体系、反应条件以及序列SEQ ID NO:13‑18所示的探针。本发明的筛查尿路感染病原菌的多重PCR检测方法以及试剂盒结果可靠、快速、成本低，实验结果表明本发明的检测方法以及试剂盒对大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、腐生葡萄球菌、粪肠球菌、无乳链球菌、奇异变形杆菌等尿路感染病原菌的识别速度快，提高了病原体鉴定的时效性和精确性，从而对改善公共健康以及实现精准医疗提供了可能。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地说，是一种快速、简易、低成本筛查尿路感染病原菌的试剂盒及其应用。

背景技术

尿路感染又称泌尿系感染，是病原微生物引起的肾脏、输尿管、膀胱和尿道等泌尿系统各个部位感染的总称。尿路感染是常见的感染性疾病，全世界每年发生尿路感染近1.5亿人次，40％～50％女性一生中发生过尿路感染。在我国发生的院内感染中9.4％～50％来自尿路感染。严重的尿路感染，如复杂性尿路感染和肾盂肾炎易引起脓毒症，甚至引起感染性休克。最常见的病原菌包括大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、肠球菌和克雷伯氏菌等。

快速的临床微生物诊断方法可对感染性疾病做出快速、准确的病原学诊断确诊依据，为临床医生提供治疗、预防建议和咨询服务；同时可检测和预警感染的爆发，确定爆发的来源并及时控制其播散、提供药敏检测数据，为临床经验用药提供指导。因此，亟待开发一种能够快速、准确、低成本筛查病原菌的检测方法以及试剂、试剂盒。

中国专利申请：CN201610318778.6公开了一种检测尿路感染致病菌的基因芯片试剂盒及其检测方法。所述包括用于检测的基因芯片和检测体系，其中，所述基因芯片包括工作电极、参比电极和辅助电极，所述工作电极上标记有捕获探针；所述检测体系包括相互独立的DNA提取液、PCR扩增反应液、PCR产物酶液、杂交液、检测液、空白对照、阳性质控品和阴性质控品。中国专利申请：CN201510022361.0公开了一种基于菌毛多样性的尿路感染大肠杆菌的分型方法，特别是涉及对尿路感染大肠杆菌的分型方法，该方法通过三种菌毛抗原基因(yagV,fimF,fimH)的进化分析以及菌毛抗原类型的鉴定确定尿路感染大肠杆菌的型别，包括样品预处理—扩增—电泳检测结果—切胶回收电泳样品—测序—序列比对，构建进化树。同时也公开了菌毛抗原多样性在尿路感染大肠杆菌分型中的应用。但是关于本发明一种快速、简易、低成本筛查尿路感染病原菌的试剂盒及其应用目前还未见报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种快速、简易、低成本筛查尿路感染病原菌的试剂盒及其应用。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

第一方面，本发明提供了一种筛查尿路感染病原菌的引物组合，包含序列如SEQID NO:1-12所示的引物，

AAGAGAGTTTCTAATTGAGCACAGGT(SEQ ID NO:1)

CGATGTTAGTGCAAACTCATATTGTT(SEQ ID NO:2)

CGATCTGTTYGGCTGGTTTG(SEQ ID NO:3)

AGGCGAGTATGRTGCAGCA(SEQ ID NO:4)

GCGTATACGTAGCACTTGTAACGG(SEQ ID NO:5)

GCTACAGGTGGTATGGGTGATAC(SEQ ID NO:6)

CGATTCGTAAAGAAGCCAAAGC(SEQ ID NO:7)

GCTACATTGGAAACTGTTAAAGGATTATC(SEQ ID NO:8)