[发明专利]尿液中的CD24阳性表达细胞及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及生物医药领域，特别涉及尿液中的CD24阳性表达细胞及其制备方法和应用；本申请从肌肉损伤患者的自身尿液中，发现并筛选出尿液来源的细胞中一类具有CD24阳性表达的细胞，该尿液细胞中CD24阳性表达的细胞能够体外诱导条件下成肌分化并与肌细胞发生融合形成融合肌小管；经过验证，将尿液细胞中CD24阳性表达细胞移植入动物体内后在肌肉损伤部位能够减轻炎症反应症状并实现肌肉再生修复，可用于制备修复肌肉损伤治疗的相关药物，由于本申请治疗用的细胞来源于患者自体，具备个体化精准治疗的特征，能够快速实现患者自体细胞治疗，避免移植的免疫排斥反应。

【技术领域】

本发明涉及生物医药领域，特别涉及尿液中的CD24阳性表达细胞及其制备方法和应用。

【背景技术】

由于外力创伤、衰老等因素造成的肌肉损伤和肌肉缺失会引发压力性尿失禁和骨骼肌缺损等症状，最终会导致患者运动困难以及行动不便，对病人的日常生活及社会活动都会造成很大困扰。目前，对于此类肌肉损伤的临床治疗主要局限于病人自身康复物理治疗以及部分化学药物治疗。除广泛应用的物理康复和化学治疗外，将工程材料移植治疗和细胞治疗目前也被少量应用于大体积的肌肉缺损中，但由于技术不够成熟，目前治疗效果并不理想，也没有开发出相关特效药。

压力性尿失禁、大体积骨骼肌缺损等创伤或衰老引起的肌肉损伤，仅依靠物理性康复治疗即间接的外力治疗的方式，并不能够实现对损伤组织的快速修复，会导致损伤时间过长延迟肌肉生长时间，最终导致不能治愈。常用的物理治疗由于缺乏对损伤部位的直接性干预，损伤的肌肉组织难以进行直接的再生修复，只能够达到部分程度的缓解。

目前在化学药物治疗上，采用的化学药物多为消炎止痛和活血化瘀类中药制剂，该类药物仅能缓解患者的病症，仍然做不到促进新生肌肉组织的再生从而实现对肌肉组织的特异性修复。近年来，随着干细胞和组织工程方法的发展，也为肌肉损伤治疗提供了新的方法，组织工程材料的植入能够辅助大体积肌肉缺损的治疗，但是由于植入性材料与患者本身存在生物活性及生物相容性的技术壁垒，导致植入性材料会使机体产生较大的排异反应，极大的限制了肌肉组织再生的应用；而干细胞的治疗由于细胞来源/亚群分类和成肌分化功能的差异性，对于肌肉损伤修复治疗作用仍然处在需要进一步研究的阶段。

为此，为了能对肌肉损伤部位进行精准干预，提高对肌肉损伤修复的精确治疗效果，降低病人痛苦，减少机体对药物和外部材料产生排异反应，有必要进行本申请的研究，以期能获得修复肌肉损伤更良好、有效的药物和治疗手段。

【发明内容】

鉴于上述内容，为了提高对肌肉损伤修复的精确治疗效果，降低病人痛苦，减少使用物理性康复治疗手段，对肌肉损伤部位进行精准干预，能对针对患者的自体特异性进行治疗，精准用药，使肌肉损伤快速恢复，有必要进行本申请的研究。

为达到上述目的，本申请采用了如下技术方案：

本发明的其中一个实施方案为尿液中的CD24阳性表达细胞在制备肌肉修复治疗药物上的应用。

本发明的另一个实施方案为尿液中的CD24阳性表达细胞在制备提高肌肉电生理活性药物上的应用。

上述实施例中所说的尿液中的CD24阳性表达细胞在制备药物上的应用所采用的尿液为患者的自体尿液。

在上述实施方案中所说的尿液中的CD24阳性表达细胞在制备药物上的应用，药物制剂为注射制剂。

在上述实施方案中所说的注射制剂中，细胞有效数量为1×10⁵-1×10⁸个细胞/ml。

本发明实施方案中的尿液中的CD24阳性表达细胞的制备方法如下：

(1)收集患者自身尿液、离心、分离，收集细胞沉淀物；

(2)使用KSFM培养液重悬步骤(1)获得的细胞沉淀物，继续进行原代培养；