[发明专利]一种烟草靶斑病的生物防治方法及应用

说明书

本发明涉及烟草病害防治方法领域，具体公开了一种烟草靶斑病的生物防治方法及应用，通过将含有水莱茵海默氏菌的生防菌剂喷施于旺长期的烟草叶片上对烟草靶斑病进行防治，所述水莱茵海默氏菌保藏编号为CCTCC NO:M2015245。本发明的方法能够防治烟草靶斑病，且防效可达68.8％‑86.2％。

技术领域

本发明涉及烟草病害防治方法领域，具体涉及一种烟草靶斑病的生物防治方法及应用。

背景技术

烟草属于茄科(Solanaceae)烟草属(Nicotiana)一年生草本植物。是重要的经济作物，种植面积广，烟草种植为大量烟农带来了收益，也促进了当地经济的发展。

烟草靶斑病危害烟草叶片，初为小的圆形水渍状斑点，随后迅速扩大，病斑不规则，直径可达2-10cm，病斑内的组织浅褐色，常有同心轮纹，病斑的坏死部分易碎脱落形成穿孔，形似枪弹射击后留在靶子上的空洞，因此，称之为靶斑病。我国最初是2005年在辽宁省发现的烟草靶斑病，对病斑上的病菌分离鉴定为立枯丝核菌。烟草靶斑病主要危害烟草成熟期叶片,造成叶片穿孔和坏死，降低烟叶品质和等级，严重地块烟叶失去烘烤价值，甚至绝产绝收，给烟农造成严重损失。

目前对于烟草靶斑病的防治大多是利用化学药剂喷施进行防治，主要有嘧菌酯、苯甲嘧菌酯等，对烟草靶斑病有一定的防治效果；但是长期使用化学药剂防治病害，容易使得病原菌产生抗药性，同时长期使用也对环境产生危害，因此，寻找新的生物防治方法是迫在眉睫的。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种烟草靶斑病的生物防治方法及应用，通过在烟草叶片上喷施生防菌剂稀释液，能够防治烟草靶斑病，且防效高达68.8％-86.2％。

本发明的第一个目的是提供一种烟草靶斑病的生物防治方法，具体为：在烟草叶片上喷施生防菌剂稀释液；

所述生防菌剂的有效成分为水莱茵海默氏菌；

所述水莱茵海默氏菌保藏编号为CCTCC NO:M2015245；

所述生防菌剂稀释液中水莱茵海默氏菌的有效活菌数为6ⅹ10⁶-6ⅹ10⁸cfu/mL。

进一步地，所述的生防菌剂稀释液喷施时期为烟草九叶期至旺长期。

进一步地，所述生防菌剂稀释液由生防菌剂用无菌水稀释0-100倍获得。

进一步地，所述生防菌剂中莱茵海默氏菌的有效活菌数为6ⅹ10⁸cfu/mL。

进一步地，所述生防菌剂的制备过程为：

S1，菌悬液制备：将水莱茵海默氏菌于LB固体培养基平板上进行划线活化培养，纯化后挑取单菌落转接至LB液体培养基中培养24h，离心获得菌体，将菌体加入到无菌生理盐水混合均匀获得OD₆₀₀等于0.7的菌悬液；

S2，生防菌剂制备：将菌悬液按照体积比3mL:100mL加入到LB液体培养基中于32℃、140r/min下培养48h，获得生防菌剂。

进一步地，S1中，水莱茵海默氏菌的培养条件为32℃、140r/min。

进一步地，S1中，离心条件为4℃，4000r/min，离心15min。

本发明的第二个目的是提供了所述生防菌剂在烟草靶斑病防治中的用途。

进一步地，所述烟草靶斑病是由立枯丝核菌引起的。

本发明的第三个目的是提供了所述的水莱茵海默氏菌在烟草靶斑病防治中的用途。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：