[发明专利]算盘七中Blestriarene B的提取方法及其抗肿瘤应用

说明书

本发明公开了算盘七中Blestriarene B的提取方法及其抗肿瘤应用。该提取方法条件温和，操作简单，成本低廉。经过本发明上述提取方法提取到产物经过结构鉴定为Blestriarene B，对Blestriarene B的抗肿瘤实验结果表明，Blestriarene B对乳腺癌细胞MCF‑7、肝癌细胞HepG2都具有一定的抑制作用，有望应用于上述肿瘤的药物开发工作中。

技术领域

本发明属于天然产物化学技术领域，具体涉及算盘七中Blestriarene B的提取方法及其抗肿瘤应用。

背景技术

肿瘤在中医病症中属于“癥瘕积聚”，主要是气滞而导致血瘀所致，中医治疗大多以消积，软坚，化痰，逐瘀，散结，消癥，解毒等方法，因此，具有“清热解毒、化痰散结”药性的中药常用于肿瘤疾病的治疗。以中医药理论为指导的中药，在肿瘤疾病的治疗中，具有多靶点，多途径，多效应，不易产生耐药性的优势，使其在肿瘤的治疗中越来越受到重视。

算盘七为兰科植物杜鹃兰Cremastra appendiculata(D.Don)Makina的干燥假鳞茎，多年生草本，叶如禾苗，花为紫红色穗状顶生，根块扁球形，形似算盘子故而得名，又因根块外披黄褐色皮毛，所以又名毛慈菇。根块呈不规则扁球形，高1.8～3cm，膨大部直径1～2cm，表面凹凸不平，有皱纹与纵沟，膨大部多数有三条微突起的环节，故民间又称“三条箍”；质坚硬，难折断，断面灰白色，气微、味淡，带粘性。算盘七为属于陕西七药中的一种，也是中药“山慈菇”的正品基源植物之一。山慈菇为常用抗肿瘤中药，始载于唐《本草拾遗》。我国2015年药典规定，山慈菇为兰科植物杜鹃兰Cremastra appendiculata(D.Don)Makino、独蒜兰Pleione bulbocodioides(Franch)Rolef和云南独蒜兰Pleione yunnanensisRolfe的干燥假鳞茎，具有清热解毒、化痰散结的功效，主要用于痈肿疔毒、瘰疬痰核、蛇虫咬伤、癓瘕痞块。临床多用以治疗肝癌、乳腺癌、肺癌、黑色素瘤等多种肿瘤疾病。

目前从算盘七中分离得到的化学成分包括：菲类、二氢菲类、联苄类、黄酮类、生物碱类和萜类化合物等，此外，还含有少量蒽醌、甾体及其他类化学成分。并有研究对算盘七的甲醇提取物，乙醇提取物，乙酸乙酯萃取部位以及多糖等的抗肿瘤作用进行了评价，但并无关于Blestriarene B的提取方法和该化合物抗肿瘤作用的研究报道

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供算盘七中Blestriarene B的提取方法及其抗肿瘤应用。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明公开了算盘七中Blestriarene B的提取方法，包括以下步骤：

1)提取及萃取：

将算盘七药材粉碎，按照1g：(1～10)mL的料液比，采用体积分数为90％的乙醇回流提取数次，过滤得到残渣，将残渣采用体积分数为60％的乙醇回流数次，合并所有醇提液，减压浓缩至无醇味，干燥得到浸膏，将浸膏用有机溶剂萃取后得到的萃取液继续浓缩、干燥，得到萃取物干浸膏；

2)硅胶柱色谱分离

将萃取物干浸膏采用中压硅胶色谱柱进行分离，以石油醚-乙酸乙酯系统和二氯甲烷-甲醇系统进行梯度洗脱，等量收集洗脱液，根据显色情况合并洗脱液组分，并将其中按照二氯甲烷：甲醇＝20:1的比例洗脱的组分采用常压硅胶柱色谱进行分离，经二氯甲烷-甲醇系统洗脱，再在二氯甲烷：甲醇＝20:1的洗脱液中洗脱得单一成分，经重结晶处理，获得Blestriarene B。

优选地，步骤1)中，采用体积分数为90％的乙醇回流提取3次，每次2h；残渣采用体积分数为60％的乙醇回流3次，每次2h。

优选地，步骤1)中，将浸膏萃取具体操作如下：