[发明专利]一种青霉菌群复配协同降解纤维素复合酶制备方法

权利要求书

1.一种青霉菌群复配协同降解纤维素复合酶制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)XZH-2、青霉(Penicillium sp.)XZH-6、桔青霉菌(Penicillium citrinum)XZH-16、青霉(Penicillium sp.)XZH-22、粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)N1和橙色嗜热子囊菌(Thermoascus aurantiacus)T2分别接种至PDA斜面培养基，静置培养；然后挑选上述菌株分别接种至PDA液体种子培养基中进行活化培养，得到活化菌株；将上述活化菌株复配后接种于固态发酵培养基中发酵培养，得到固态发酵物；将固态发酵物浸提，收集浸提液，经离心后取上清即为具有协同降解纤维素作用的复合酶组合制剂。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的将活化菌株复配是将草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)XZH-2、青霉(Penicillium sp.)XZH-6、桔青霉菌(Penicilliumcitrinum)XZH-16、青霉(Penicillium sp.)XZH-22、粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)N1和橙色嗜热子囊菌(Thermoascus aurantiacus)T2的活化菌株按1:8:1:1:1:1的体积比复配。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的PDA液体种子培养基每升是通过以下方法制备的：称取200g去皮土豆，加水煮沸，经纱布过滤得土豆浸汁，然后加入葡萄糖20g，溶解后加水定容至1L。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的固态发酵培养基包括稻秆和营养盐溶液，所述的营养盐溶液的添加量为每5g稻秆加入10.5mL营养盐溶液；所述的营养盐溶液成分为：每升营养盐溶液中含有(NH₄)₂SO₄ 10.0g，KH₂PO₄ 4.0g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，CaCl₂·2H₂O 0.5g，余量为水。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的静置培养是在30℃静置培养3～5天；所述的活化培养是在30℃，150rpm培养3天，所述的发酵培养是在30℃，150rpm培养5天。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述将固态发酵物浸提，收集浸提液，经离心后取上清即为具有协同降解纤维素的复合酶组合制剂，具体为：用pH4.8醋酸-醋酸钠缓冲液浸泡固态发酵物，30℃，150rpm震荡1h，收集浸提液，8000rpm，4℃离心5min，取上清即为具有协同降解纤维素作用的复合酶组合制剂。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述草酸青霉菌(Penicilliumoxalicum)XZH-2的保藏编号为CGMCC No.21425；青霉(Penicillium sp.)XZH-6的保藏编号为CGMCC No.23296；桔青霉菌(Penicillium citrinum)XZH-16的保藏编号为CGMCCNo.21426；青霉(Penicillium sp.)XZH-22的保藏编号为CGMCC No.23297；粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)N1的保藏编号为CGMCC No.3.14349；橙色嗜热子囊菌(Thermoascusaurantiacus)T2的保藏编号为CGMCC No.3.15520。

8.权利要求1-7任一项所述的制备方法制备得到的具有协同降解纤维素作用的复合酶组合制剂。

9.根据权利要求8所述的具有协同降解纤维素作用的复合酶组合制剂，其特征在于，所述的复合酶组合制剂含有纤维素酶和裂解性多糖单加氧酶。

10.权利要求8所述的具有协同降解纤维素作用的复合酶组合制剂在纤维素水解中的应用。