[发明专利]乳双歧杆菌TY-S01在制备预防或缓解便秘的药品中的应用

说明书

乳双歧杆菌TY‑S01(Bifidobacteri umlactisTY‑S01)在制备预防或缓解便秘的药品中的应用，该菌株经中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCCNo.21255，保藏日期为2020年11月27日。通过动物验证实验确定TY‑S01能改善盐酸洛哌丁胺诱导的小鼠便秘，缩短首次排出黑便的时间，提高粪便含水量，加速肠道蠕动；能够有效抑制小肠绒毛的损伤。此外，TY‑S01显著增加了小鼠粪便中乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸水平。最后，TY‑S01可通过提高肠道SCFAs水平缓解便秘。本发明提供的乳双歧杆菌TY‑S01可提高便秘小鼠肠道短链脂肪酸含量，从而缓解便秘，因其无副作用、效果良好，为便秘患者提供了一种新的治疗理念。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及乳双歧杆菌TY-S01在制备预防或缓解便秘的药品中的应用。

背景技术

便秘是一种常见的慢性疾病，也是临床上常见的消化系统疾病，其主要表现为排便量减少、粪便干结、排便困难和排便次数减少等，由于病程长，症状持续反复，给患者带来了极大痛苦。便秘在人群中的发生率高达27％，不同地区、不同性别和不同年龄的人群均有可能受其影响，长期的排便困难轻则引起痔疮、胀气、失眠、内分泌失调、肥胖和失血性贫血等，重则可能诱发或者加重其他疾病，如心血管疾病、肾脏疾病、帕金森氏病和结肠直肠癌等。

针对便秘症状，临床上通常使用药物或手术治疗便秘，药物治疗虽然有一定的作用，但是长期用药身体可能会产生抗药性、依赖性和其他并发症，例如药物依赖、恶心和严重腹泻；手术治疗立竿见影，但治标不治本，平时不注意很容易复发。

因此，在治疗便秘过程中，现有技术仍在存在上述不足，所以寻找一种安全性高，疗效好和毒副作用小的便秘治疗理念变得尤为重要。

发明内容

本发明的目的是提供乳双歧杆菌TY-S01在制备预防或缓解便秘的药品中的应用。根据16S rDNA同源性分析结果显示TY-S01为乳双歧杆菌。通过验证实验确定TY-S01能改善盐酸洛哌丁胺诱导的便秘，缩短首次排出黑便的时间，提高粪便含水量，加速肠道蠕动；能够有效抑制小肠绒毛的损伤。此外，TY-S01显著增加了粪便中乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸水平。最后，TY-S01可通过提高肠道短链脂肪酸水平，从而缓解便秘。

乳双歧杆菌的分离纯化：收集无尿液污染的广西巴马长寿老人粪便样品，经过无菌生理盐水稀释，再涂布于添加了半胱氨酸的MRS固体培养基上，厌氧培养后，选取形态各异的单菌落采用平板划线法分离菌株，然后从划线纯化的平板上再挑取一个单菌落继续进行划线纯化，得到纯化的菌株。

分离菌株的菌落形态和细胞形态：菌株纯化后在固体培养基中形成单菌落，菌落形态一致，呈半球形，白色，表面光滑湿润，边缘平整。革兰氏染色后在显微镜下观察到紫色细胞形态，形状呈杆状，判定为革兰氏阳性菌(G⁺)。

PCR扩增16S rDNA序列：对纯化的菌株采用25μL反应体系进行PCR扩增，序列扩增后，委托生工生物工程(上海)股份有限公司对检测合格的PCR扩增产物进行测序，获得序列后，使用BLAST(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST)在GenBank中进行搜索和相似性比对。

菌株16S rDNA序列分析：在GenBank数据库中进行序列比对，16S rDNA同源性分析结果显示TY-S01为乳双歧杆菌。乳双歧杆菌TY-S01的16S rDNA基因扩增产物的序列如SEQID No.1所示。

保藏信息：

本发明所述的有助于缓解便秘的乳双歧杆菌TY-S01已经进行保藏，具体保存信息如下：

保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)；

地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；