[发明专利]提高漆酶催化活性的方法及突变体Lcc9-M1、基因和应用有效
| 申请号： | 202111566938.6 | 申请日： | 2021-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN113930401B | 公开（公告）日： | 2022-03-22 |
| 发明（设计）人： | 罗会颖;张亨;秦星;黄火清;王亚茹;柏映国;王苑;涂涛;苏小运;张杰;王晓璐;张红莲;于会民;杨浩萌;姚斌 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 | 代理人： | 尹超群 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 提高 催化 活性 方法 突变体 lcc9 m1 基因 应用 | ||
1.催化活性提高的漆酶突变体Lcc9-M1，其特征在于，所述漆酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3或NO:4所示。
2.一种提高漆酶的催化活性的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
将氨基酸序列如SEQ ID NO:1如所示的野生型漆酶Lcc9的第165位氨基酸由Asp突变为Glu、第253位氨基酸由Met突变为Ile、第268位氨基酸由Val突变为Ile 、第372位氨基酸由Ser突变为Leu 、第447位氨基酸由Asp突变为Asn，
或者，将氨基酸序列如SEQ ID NO:2如所示的野生型漆酶Lcc9的第145位氨基酸由Asp突变为Glu、第233位氨基酸由Met突变为Ile、第248位氨基酸由Val突变为Ile 、第352位氨基酸由Ser突变为Leu 、第427位氨基酸由Asp突变为Asn。
3.漆酶突变体基因，其特征在于，编码权利要求1所述的催化活性提高的漆酶突变体Lcc9-M1。
4.根据权利要求3所述的漆酶突变体基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO:7或NO:8所示。
5.包含权利要求3所述的漆酶突变体基因的重组载体。
6.包含权利要求3所述的漆酶突变体基因的重组菌株。
7.制备催化活性提高的漆酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)用包含权利要求1所述的催化活性提高的漆酶突变体Lcc9-M1的编码基因的重组载体转化宿主细胞，得重组菌株；
(2)培养重组菌株，诱导表达漆酶；
(3)回收并纯化所表达的漆酶。
8.权利要求1所述的催化活性提高的漆酶突变体Lcc9-M1被添加到饲料、食品中的应用。
9.权利要求1所述的催化活性提高的漆酶突变体Lcc9-M1用于污水处理的应用。
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